第一部分： 研究背景及目的: 目前世界范围内癫痫的患病率在0.5—1.5％，我国癫痫病人约700-800万左右，大约40％癫痫为特发性，其中遗传因素在特发性癫痫病因中起到重要作用，明确遗传学病因，有利于明确诊断及针对性治疗，促进癫痫控制。常染色体显性遗传夜发性额叶癫痫(autosomal dominant nocturnal frontal lobe epilepsy，ADNFLE)可由烟碱乙酰胆碱受体(neuronal nicotinic acetylcholine receptor，nAChR)α4、β2和α2亚单位编码基因(CHRNA4、CHRNB2、CHRNA2)跨膜区突变所致。ADNFLE与临床中更常见的散发病例夜发性额叶癫痫(nocturnal frontal lobe epilepsy，NFLE)在临床相难于鉴别，并且有报道在散发NFLE患者中发现ADNFLE致病突变CHRNA4—C755T，且为新发突变，并在家系中传递，使NFLE散发病例发展为受累病例更多的ADNFLE家系。结合我国ADNFLE家系罕见、NFLE散发病例多见的实际情况，本研究在中国人群NFLE散发病例中筛查nAChR编码基因CHRNA4、CHRNB2和CHRNA2中与ADNFLE相关突变外显子，探讨nAChR相关基因在NFLE发病机制中的作用。 方法: 33名中国NFLE患者，经临床资料、家族史及辅助检查VEEG、MRI等综合诊断，男19名，女14名，平均年龄18.76±7.59岁。外周血白细胞酚氯仿法提取基因组DNA，依据CHRNA4、CHRNB2基因序列及其中ADNFLE相关突变位点，应用软件Primer5.0设计聚合酶链反应(PCR)引物及参考文献选取CHRNA2相关引物，PCR分别扩增CHRNA4、CHRNB2、CHRNA2基因中包含跨膜区1—3和与ADNFLE相关已知突变序列，经双向测序筛查突变，通过测序图阅读、文献检索，确认已知突变、单核苷酸多态性与新型变异。对可疑NFLE致病相关新型变异，应用限制性内切酶(Cac8Ⅰ、MscⅠ)酶切及1％琼脂糖凝胶电泳或12％聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，并以同样方法在100名中国人群健康对照组中筛查新型变异，比较新型变异在病例组及健康对照组的频率，初步确认突变。经突变性质分析、家系传递分析及氨基酸进化保守度分析等遗传学方法比较，探讨突变在NFLE中的作用。 结果: 中国人群NFLE散发病例组在CHRNA4筛查中，于一名发病较早、抗癫痫药物效果较差患者中，发现一种新型杂合错义突变G923A，导致位于nAChR-α4亚单位第三、四跨膜区间第二个细胞内环、接近第三跨膜区处发生R308H突变，即精氨酸替换为组氨酸，在100名中国人群健康对照筛查中，未见这一突变；还发现一种可能的新型多态A1054 G，在200条对照染色体中发现1个这种变异。在CHRNA4筛查中，发现一种已知多态T1125G。NFLE散发病例组在CHRNB2和CHRNA2筛查中，未见突变。 结论: 1.中国人群散发NFLE病例中存在CHRNA4—E5错义突变R308H，可能为NFLE新型遗传学病因。 2.CHRNA4—E5非跨膜区编码基因突变可能与NFLE/ADNFLE发病相关。 3.CHRNA4为NFLE/ADNFLE相关突变热点，CHRNA2、CHRNB2突变为两者较少见病因。 第二部分： 研究背景及目的: 目前世界范围内癫痫的患病率在0.5—1.5％，我国癫痫病人约700-800万左右，其中30-40％为药物难治性，以切除癫痫源为目的的外科手术是治疗难治性癫痫的有效手段，因而对与癫痫源存在密切联系的脑功能区进行精确定位，以较少手术损伤，已成为癫痫术前评估的必要程序和研究热点。大量研究表明，因准确、可靠、无创的优势，功能磁共振成像(functional magnetic resonance imaging，fMRI)已成为癫痫患者术前语言评估中的一种常规应用技术。还有研究表明，应用fMRI显像中感兴趣区激活情况计算的半球侧化指数(laterality index，LI)及语义任务组块设计对语言优势半球(hemispheric language dominance，HLD)的评价准确性更高、局部LI中额部LI较颞顶区LI更显示与Wada试验一致，及LI受患者癫痫发病年龄、癫痫病程等因素影响。同时，也有研究显示在语义任务fMRI中英语等西语系较汉语更易显示偏侧优势。近来，有研究表明癫痫患者术前fMRI评估语言中LI对左前颞叶切除术(left anterior temporal lobectomy，L—ATL)术后患者命名功能下降有预测作用，而颞顶区LI显示更强的预测效力。由于，采用汉语任务、在中国人群颞叶癫痫患者中应用fMRI的研究还较为缺乏。因此，本研究中，应用fMRI技术评估中国药物难治性颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy，TLE)患者术前HLD，采用汉语语义任务及额下回、颞顶区总LI为标准判定HLD，并应用语言量表于患者术前术后评估语言功能，探讨fMRI技术在应用汉语语义任务下，于中国颞叶癫痫患者HLD评估中的成像特点、术后语言功能预测作用及LI相关影响因素分析。 方法: 在北京协和医院癫痫中心及神经外科就诊且手术的10名药物难治性非病灶性颞叶癫痫患者中进行了一个前瞻性队列研究。通过病史、临床表现、术前综合评估确诊入组病例。收集患者临床资料。患者于术前测量患者语言功能量表(ABC)、fMRI评估语言优势半球。术后6—9个月随访及测量语言功能量表(ABC)。在fMRI评估中，应用汉语语义任务，以左额下回、左颞顶区及对应右侧脑区为感兴趣区，计算LI—总、额下回LI及颞顶区LI，通过Cohen’skappa检验，比较各局部LI与LI—总一致性。通过X2检验、Spearmans参数计算分析LI与年龄、发病年龄、病程、癫痫源侧等相关性。通过患者术前及术后语言功能量表(ABC)评分变化，分析LI对前颞切除术术后命名功能改变的预测作用。 结果: 采用汉语语义任务fMRI评估中国药物难治性颞叶癫痫患者术前语言功能，结果表明LI—颞顶(kappa=1)较LI—额(kappa=0.375)更准确地指示HLD；同时，本研究显示癫痫发病年龄(r=0.778，p<0.01)、患病时间(r=0.744，p<0.01)与癫痫患者的LI显著相关，及LI—总对L—ATL组患者术后语言命名功能下降预测与命名定性判定间一致性良好(kappa=0.5)、LI—总与R—ATL组患者术后命名改变显著呈负相关(r=-0.924，P<0.01)。 结论: 本研究首次表明在应用fMRI汉语语义任务评估颞叶癫痫患者术前HLD中，LI—颞顶而不是LI—额与LI—总指示的HLD更相一致；癫痫发病年龄、癫痫病程对形成非典型HLD起作用；fMRI—LI对前颞叶切除术术后命名功能改变具有预测作用。