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共轭亚油酸(CLA)是具有许多重要生理功能的天然不饱和脂肪酸之一。人体及动物实验表明,它具有降低脂肪、抗癌、抗动脉粥样硬化、增强肌体免疫能力、改善骨组织代谢等多种独特的生理功能。本研究在大黄鱼日粮中添加了不同水平的共轭亚油酸,探讨了共轭亚油酸对大黄鱼生长、脂肪代谢、免疫性能及对大黄鱼肌肉品质的影响,并对大黄鱼肝脏中的PPARa和PPARγ基因进行了克隆与表达,从分子水平上阐述了共轭亚油酸影响大黄鱼脂肪代谢的作用机制。主要研究内容和结果如下:1.日粮CLA水平对大黄鱼生长性能和脂肪代谢的影响本试验研究了日粮CLA对大黄鱼生长性能、体成分、脂质组成、脂肪代谢酶活性和脂肪酸成分的影响。在基础日粮中用CLA代替鱼油,添加水平分别为0%、1%、2%和4%(试验D1-D4组)。经过10周的饲喂,结果表明:饲喂1%的CLA能够提高大黄鱼的特定生长率(SGR)和肥满度(CF),饲喂高含量(2%和4%)的CLA则降低了SGR,但是四个试验组之间的差异不显著(P＞0.05)。日粮中添加CLA对大黄鱼的饵料系数(FCR)没有影响,但是肝体比(HSI)和脏体比(VSI)均有所提高,各处理组(D2-D4)之间差异也不显著(P＞0.05)。与对照组(D1)相比,大黄鱼鱼体的水分、粗蛋白和灰分均有所增加,粗脂肪含量有所下降,但是差异不显著(P＞0.05)。随着日粮中CLA水平的增加,大黄鱼肝脏和肌肉中的脂肪含量也有所降低(P＞0.05)。与D1组相比,CLA能够显著降低血清和肝脏中甘油三酯(TG)的含量(P＜0.05)。血清中的TG含量随着CLA含量的增加显著降低,D2组与D3和D4组相比差异显著(P＜0.05)。在肝脏中,CLA处理组之间差异不显著(P＞0.05)。与此同时,CLA能够显著增加血清和肝脏中游离脂肪酸(FFA)的含量(P＜0.05)。在血清和肝脏中,D4组的FFA含量最高,并且与D1和D2组相比差异显著(P＜0.05)。随着日粮中CLA含量的增加,血清中胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量也随着降低,CLA处理组与D1组相比有显著差异(P＜0.05)。血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量随着CLA含量的增加而增加。CLA处理组与D1组相比差异显著(P＜0.05),但是D2、D3和D4组之间无显著差异(P＞0.05)。日粮中添加CLA能够显著降低大黄鱼血清和肝脏中肝脂酶(HL)和脂蛋白脂酶(LPL)的活性。在血清和肝脏中,D2、D3和D4组的HL和LPL活性与D1相比差异显著(P＜0.05),而且D2组与D3和D4相比也具有显著性差异(P＜0.05)。此外,CLA对大黄鱼血清和肝脏中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、脂肪合成酶(FAS)和苹果酸酶(ME)的活性有着不同程度的影响,1%CLA对血清和肝脏中的G6PD活性没有显著影响(P＞0.05)。但是高含量的CLA(2%和4%)能够显著降低血清和肝脏中的G6PD活性,并且与D1组相比差异显著(P＜0.05)。CLA能够显著降低大黄鱼血清中的脂肪酶(FAS)活性,与D1相比,D4组的FAS活性降低了16%,且差异显著(P＜0.05)。与此同时,CLA也能够降低大黄鱼肝脏中的FAS活性,但D1-D4组间差异不显著(P＞0.05)。大黄鱼血清和肝脏中苹果酸酶(ME)的活性随着日粮中CLA含量的增加而降低。在血清中,D3和D4组ME活性与D1相比差异显著(P＜0.05),而D2组与D1组相比差异不显著(P＞0.05)。在肝脏中,D2、D3和D4组之间的ME活性无显著差异(P＞0.05)。CLA对肝脏和肌肉脂肪酸成分有显著的影响。饱和脂肪酸(SFA)的主要成分是C16:0;单不饱和脂肪酸(MUFA)的主要成分是C18:1 n-9。随着CLA含量的增加,肝脏和肌肉中SFA含量和多不饱和脂肪酸(PUFA)含量也随之增加,而MUFA含量随之降低,并且D1-D4之间差异显著(P＜0.05)。在PUFA中,EPA(C20:5 n-3)和DHA(C22:6 n-3)约占PUFA的65%和63%,并且随着CLA含量的增加而显著增加。此外,肝脏和肌肉中CLA的含量与日粮中CLA含量相同呈等比增加。2.日粮CLA水平对大黄鱼免疫和抗氧化性能的影响使用不同CLA含量的日粮经过10周的饲喂后,D1-D4组大黄鱼的脾脏指数随着CLA含量的增加而显著增加,且与对照组相比差异显著(P＜0.05)。但是D3组和D4间无显著差异(P＞0.05)。血清中的溶菌酶和免疫球蛋白M(IgM)活性均有所提高,且与对照组相比差异显著(P＜0.05)。CLA能够提高血清补体C3、C4的活性,D3、D4组与D1组相比差异显著(P＜0.05)。此外,D3组的补体活性显著高于其它三组(P＜0.05),与D1组相比,补体C3、C4活性分别提高了59%和65%。CLA也能够提高血清和组织中的SOD活性。肝脏中的SOD活性最高为202.89 U/ml,约为血清和肌肉SOD活性的1.7倍。D2-D4组的血清和肝脏SOD活性均显著高于D1组(P＜0.05),但是CLA处理组之间差异并不显著(P＞0.05)。3.日粮CLA水平对大黄鱼肉品质的影响日粮中添加CLA能够显著影响大黄鱼肌肉的鲜味氨基酸和肌苷酸含量,且随着CLA含量的增加而增加(P＜0.05)。采用微波蒸馏-固相微萃取技术萃取大黄鱼肌肉中的挥发性成分,共检测出54中化合物,其中主要为挥发性醇类和羰基化合物。通过比较发现,各组大黄鱼肌肉挥发性化合物的种类及百分含量没有显著差异(P＞0.05),但是能够提高部分具有特殊气味的醛酮类化合物含量。4.日粮CLA水平对大黄鱼肝脏PPAR基因表达的影响通过对大黄鱼肝脏PPARa和PPARγ基因进行克隆,确定了该两种基因的DNA序列,并采用实时荧光定量PCR法对PPARa和PPARγ基因进行了表达水平的分析,结果表明,日粮中添加CLA能够显著提高大黄鱼肝脏中PPARa和PPARγ基因的表达量(P＜0.05)。