猪促卵泡激素β亚基基因克隆及表达研究

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促卵泡激素(Follicle Stimulating hormone ,FSH)是动物垂体前叶分泌的一种促性腺激素,属于糖蛋白激素家族.促卵泡激素在垂体中含量最少,最不稳定,但却具有极其重要的生理功能.促卵泡激素由α、β两个糖基化亚基组成.一般认为α亚基具有负责信号转录的作用,而β亚基是功能亚基,参与受体结合,激素生理作用的特异性是由β亚基所决定的.该论文是国家自然科学基金项目"猪促卵泡激素基因表达及调控研究"中的部分内容,主要工作是从猪脑垂体中提取总RNA后,利用Smart cDNA试剂盒合成猪促卵泡激素β亚基cDNA,去除自身的信号肽序列后,将其克隆于质粒pPIC9K中,电转化毕赤酵母,Southern-blot检测结果表明β亚基基因已经整合到酵母染色体上;工程菌在发酵过程中用甲醇进行诱导表达,将上清液进行SDS-PAGE及Western-blot分析,结果表明构建的工程菌能够产生有免疫学活性的猪促卵泡激素β亚基.国内利用生物技术表达猪促卵泡激素的研究只有作者所在进行,并且在以前的工作中已取得了一定突破,该项目为使猪促卵泡激素的工业化生产奠定基础.
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