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前言 在肝脏外科中，肝脏缺血再灌注损伤(Hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)可导致肝细胞发生一系列结构与功能的损害，进而引起肝脏功能衰竭，甚至全身多脏器功能衰竭(MODS)，是影响疾病预后、手术成功率以及病人生存率的主要因素之一。HIRI的确切机制目前尚不完全清楚，多数学者认为与氧自由基及钙离子超载等因素有关。 在以往的研究中，已有多种方法应用于HIRI的防护，如缺血预处理、门腔转流或部分人肝血流阻断等，但由于其本身所具有的机体损害性、应用的局限性或操作的复杂性等原因，临床应用受到限制；同时亦有多种药物应用于HIRI的保护，如钙离子拮抗剂、蛋白酶抑制剂等，但效果不确定或并不令人满意。因此，有必要对HIRI的防治行进一步的研究。 还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是体内一种重要的抗氧化剂。研究证实，应激时提高与维持组织中GSH的含量，可有效地减轻组织的损伤；热休克蛋白70(Heat shock proteins 70,HSP70)是生物细胞在应激过程中产生的一类生物进化上高度保守的蛋白质，其可以提高组织细胞对应激的耐受能力，抵御各种损害因素的影响，是一种内源性的保护机制。有关GSH、HSP70在HIRI中所起的作用及相关因素对之的影响，一直是实验与临床研究的热点问题。 作为条件必需氨基酸，谷氨酰胺(Glutamine,Gln)对务器官和组织细胞具有重要而独特的代谢功能。研究发现，在多种疾病及应激状态下，组织中Gln的水平与疾病的预后及转归密切相关，而补充GIn则可以缩短患者住院时间、改善疾病的预后及病人的生存率。目前在临床中，多采用丙氨酸一谷氨酸胺（Alanyl－Gluta－mine，Ua－Gi）二肽作为Gi的供体。 以前的研究证实，Gin可维持组织中GSH的含量或增强脏器HSP70的表达，从而保护心肌、骨骼肌及肠道等脏器的缺血再灌注损伤。然而，有关Gin在HIRI中是否具有保护作用，及其对肝脏GSH含量、HSpoo表达影响，目前应用研究不多。 我们利用大鼠HIRI模型，观察Ala－Gi（GIn）对肝脏生化酶类以及还原型GSH、HSpoo表达的影响，初步探讨la－Gin（Gi）对HIRI的保护作用及其可能机制。 材料与方法 雄性Wistar大鼠，参照第三军医大学的静脉营养模型，行右侧颈外静脉插管，微量泵输注 0．9％Nacl液问讪hL观察 3天。然后，大鼠随机分为Gi组＊组）与对照组＊组人人组经静脉导管给予 3％Ala－GIn溶液（速度 Zrnl／h八 C组以相同速度给予同等量0．9％生理盐水，均输注3天K8价d人第7天开腹，离断肝周韧带，消除肝脏侧支循环，夹闭肝门（Pingle ％法）使肝脏缺血，持续30分钟后松开血管夹使肝血供恢复。分别于再灌注后1／J’时、24小时上8小时自腹主动脉取血，用全自动生化分析仪测定血清中的谷丙转氨酶（ALTX乳酸脱氢酶（LDH）水平；取肝组织按谷济甘肽（GSH入超氧化物歧化酶门OD）试剂盒说明测定其GSH、SOD的水平；用Western Blotting法测定驱注后l、24、48／J’时肝组织中HSpoo的表达；并取肝组织置于10％福尔马林溶液中固定以用于作病理学检查；再取肝组织置于2．5％戊二醛溶液中固定以用于作电镜检查；计算两组大鼠的术后24小时生存率。 血清生化酶 ALT、LDH，肝组织中 GSHSOD的数值以 i。S表 ·2·示，用 t检验进行统计学处理；术后生存率用 X‘检验。所有数据资料均采用SPSS软件进行处理。 结 果 l．血清生化酶水平HIRI后1／J’时，G组血清ALT、LDH的水平分别为499．25 t 120．8什【／L6956．00。ZM 3．931U／L；C组的水平为823．56土328．71 IU／L、11715．31土2993．50IU／L人组显著低于C组（P＜o．05；P＜O．01）。再灌注后24小时人组血清＊u。LDH的水平分别为176．69 t 151．84IU／L、415．38 L 213．68IU／L＊组的水平为548．25。257．25 o：／o：／LJ958．so。687．321U／L，G组显著低于C组（P＜o．0二）。 2．缺血再灌注后肝脏组织中GSHJOD的水平＊ 后1／J’时人组肝组织中 GSH水平为 1216．09。152．78mgGSH／mgprot，明显高于 C组的 856．68土互 17．64mgGSH／mgProt（P＜ 0．01）；HIRI后24 ／J’时，G组肝组织中GSH 7k平为899．73 t 57．75mgGSH／mg－Prot，明显高于 C组的 800．50 t 94．79mgGSH／mgProt（P＜ 0．05）。HIRI后1小时及24小时人组肝组织中SOD活性与C组无显著性差异（145．09 t 14·66NU／mgProt vs 135．30 i 3．93NU／mg’prot，136．90。6．46 mgprot vs 136．35 t 14．25 mgl）rot少＞0．05）。 3．缺血融注后肝脏组织中HSP70的表达C组于再灌注后1小时仅有微量的HSpoo表达，其表达程度与G组无显著性差异，至再灌注后24小时A8小时其HSP70的表达明显增强；而G组在再灌注后24小时产8小时仅有轻度的增强，其表达程度明显低于C组。 4．术后生存率术后 24小时生存率 G组为 78．57％O八人明显高于C组的45．45％（10／22）（X‘二3．86，p＜0．05）。