慢性鼻窦炎是影响人类健康的常见疾病,长期大量流脓涕是困扰患者的一大主要症状。传统的治疗方法如应用抗生素、血管收缩剂、穿刺冲洗等均不能有效改善其长期流脓涕的症状。即使通过鼻内镜手术,改善了鼻窦的引流问题,术后流脓涕的问题仍不能得到有效解决。慢性鼻窦炎长期流脓涕与鼻窦黏膜中粘蛋白(mucin, MUC)的大量分泌有着密切关系,使其具有“粘液高分泌性疾病”的特点。近年来研究发现,在人呼吸道上皮中钙离子激活的氯离子通道(calcium-activatied chloride channell CaCCl或HCLCAl)参与促进上皮杯状细胞增生,增加MUC5AC的合成。在许多具有“粘液高分泌性疾病”特点的下呼吸道疾病中,如慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)、哮喘、慢性支气管炎等,已发现CaCCl均有特异性的高表达,通过应用CaCCl抑制剂尼弗灭酸(niflumic acid NFA),可以有效抑制呼吸道上皮杯状细胞再生颗粒的产生和MUC5AC的分泌,对这类疾病具有潜在的治疗作用。因此我们设想在慢性鼻窦炎的病理机制中,CaCCl可能同样发挥重要作用,通过对CaCCl的干预,观察能否改善其“高黏液素”的病理环境,从而从新的角度探讨解决其长期流脓涕的问题。因此,对CaCCl在慢性鼻窦炎中对黏蛋白MUC5AC表达的调控作用的关系进行了实验研究,全文由三部分组成：第一部分钙离子激活的氯离子通道与慢性鼻窦炎关系的研究目的：观察CaCCl在慢性鼻窦炎和/伴有鼻息肉黏膜中的表达,探讨其在慢性鼻窦炎发病机制中的作用。方法：取Ⅰ型和Ⅱ型慢性鼻窦炎患者筛窦黏膜各10例,另取10例正常筛窦黏膜作为对照。应用Real一time PCR方法检测各组鼻窦黏膜中CaCCl mRNA表达,应用免疫荧光方法观察CaCCl蛋白在各组鼻窦黏膜中的表达情况,比较CaCCl蛋白在各组中平均阳性细胞面积比。结果：CaCClmRNA在Ⅰ型和Ⅱ型慢性鼻窦炎鼻窦黏膜中的表达明显高于对照组(P<0.01),而在两组慢性鼻窦炎组之间差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅰ型和Ⅱ型慢性鼻窦炎鼻窦黏膜均见杯状细胞增生。CaCCl在两组鼻窦黏膜中均主要表达于上皮杯状细胞,平均阳性细胞面积比在Ⅰ型和Ⅱ型慢性鼻窦炎鼻窦黏膜中差异无统计学意义(P>0.05),而与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论：在基因和蛋白水平上,CaCCl在慢性鼻窦炎和/伴有鼻息肉的鼻窦黏膜中均有明显表达,其在慢性鼻窦炎的发病机制中具有重要作用,可能与上皮杯状细胞的增生及粘液高分泌有关。第二部分黏蛋白5AC与慢性鼻窦炎关系的实验研究目的：观察MUC5AC在慢性鼻窦炎和/伴有鼻息肉鼻窦黏膜中的表达,探讨其在慢性鼻窦炎病理机制中的作用。方法：实验分组同第一部分,应用real-time PCR方法检测各组鼻窦黏膜MUC5ACmRNA表达,免疫荧光方法观察MUC5AC蛋白在各组鼻窦黏膜中的表达,比较MUC5AC蛋白在各组中平均阳性细胞面积比。结果:MUC5ACmRNA在Ⅰ型和Ⅱ型慢性鼻窦炎鼻窦黏膜中的表达明显高于对照组(P<0.01),而在两组慢性鼻窦炎组之间差异无统计学意义(P>0.05)MUC5AC在两组鼻窦黏膜中均主要表达于上皮杯状细胞,平均阳性细胞面积比在Ⅰ型和Ⅱ型慢性鼻窦炎鼻窦黏膜中差异无统计学意义(P>0.05),而与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论：MUC5AC在慢性鼻窦炎和/伴有鼻息肉的鼻窦黏膜中表达明显均增高,MUC5AC在慢性鼻窦炎的发病过程中可能发挥重要作用。第三部分CaCCl在鼻窦粘膜组织培养中对MUC5AC调控作用的实验研究目的：通过对CaCCl不同方式的干预,观察体外培养的鼻窦粘膜组织中CaCCl及MUC5AC蛋白表达的变化。方法：取鼻内镜手术中切除的筛窦黏膜组织5例,采用组织块培养法培养24小时,每例组织分为5组,A组:培养液不加任何干预；B组：加入人重组TNF-a 10ng/mL；C组：加入NFA(CaCCl抑制刹)10umol/L30分钟后,加入人重组TNF-a10ng/mL;D组:加入NFAl00umol/L30分钟后加入人重组TNF-a 10ng/mL;E组：加入NFA 500umol/L 30分钟后加入人重组TNF-a 10ng/ml。以上5组培养24小时后进行western Blotting实验,观察CaCCl及MUC5AC蛋白在各组织中的表达。结果：TNF-上调CaCCl、MUC5AC蛋白表达水平(p<0.01).CaCCl抑制剂NFA下调CaCCl及MUC5AC蛋白表达(p<0.01),呈剂量依赖效应关系。结论：从蛋白水平上发现,TNF-a诱导的MUC5AC表达在体外培养的筛窦黏膜组织中被CaCCl抑制剂NFA下调。证实了在鼻窦粘膜组织培养中CaCCl对MUC5AC的分泌具有调节作用。