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背景和目的:胆汁淤积性肝病(Cholestatic liver disease,CSLD)是临床上常见的由胆汁的形成、分泌以及排泄等障碍,导致胆汁在肝脏堆积,反流入血的一类代谢疾病。由于病因多样、机制复杂等因素使CSLD在机制研究上仍存在许多难题。去乙酰化酶SIRT6是哺乳动物Sirtuins蛋白家族中的重要成员之一,具有高度保守的NAD+依赖性去乙酰化酶活性和ADP-核糖基转移酶活性。SIRT6在机体中参与调节许多重要的生理病理过程,而SIRT6在肝脏中胆汁酸代谢及胆汁淤积所导致的肝脏疾病的发生发展过程中的作用尚未报道。研究方法:在构建的肝细胞特异性敲除SIRT6(SIRT6-LKO)小鼠模型的基础上利用1%胆酸(CA)饮食模拟胆汁淤积性肝病模型,探究去乙酰化酶SIRT6在胆汁酸代谢中的作用。40只8周大小的雄性小鼠随机均分四组,给予标准饮食或添加1%CA饮食10天:WT小鼠标准饮食组(WT组)、SIRT6-LKO小鼠标准饮食组(KO组)、WT小鼠CA饮食组(CAWT组)、SIRT6-LKO小鼠CA饮食组(CAKO组)。通过血清指标分析、胆汁酸代谢关键酶的表达、肝脏形态等指标评价SIRT6-LKO对于肝脏胆汁酸代谢的影响。结果:1.通过鼠尾基因型鉴定、肝脏SIRT6的m RNA和蛋白水平验证说明成功构建SIRT6-LKO小鼠模型;2.正常饮食条件下,肝脏SIRT6敲除小鼠的血清指标总胆汁酸(TBA)、总胆固醇(TC)、总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和胆汁酸合成酶CYP7A1、CYP8B1及胆汁酸转运蛋白BSEP、NTCP和转录因子FXR的蛋白和m RNA表达水平较野生型无显著差异(p>0.05);3.CA饮食条件下,CAWT和CAKO组小鼠的血清指标TBA均值分别为18.21μmol/l和15.04μmol/l,较正常饮食组(9.08μmol/l和8.87μmol/l)明显升高(p<0.01);CA饮食组的肝脏合成酶CYP7A1、CYP8B1的蛋白和m RNA表达水平较正常饮食组显著降低,转运蛋白BSEP的蛋白和m RNA表达水平明显高于正常饮食组(p<0.05)。说明CA饮食诱导的胆汁淤积模型构建成功。4.CA饮食条件下,CAWT和CAKO组小鼠血清中的TC均值分别为3.32mmol/l和4.25 mmol/l,CAKO组小鼠血清的TC水平较CAWT组显著升高,且差异具有统计学意义(p<0.05)。CAKO组的转录因子FXR的蛋白水平较CAWT组明显降低,而这两组中其他血清指标(TBA、TBIL、ALT、AST)和胆汁酸相关蛋白(CYP7A1、CYP8B1、BSEP、NTCP)的表达无明显影响。说明在胆汁淤积的条件下,肝脏中去乙酰化酶SIRT6的敲除降低FXR的蛋白表达,说明SIRT6可能影响转录因子FXR的表达水平。结论:在正常生理条件下,肝细胞中SIRT6的敲除不影响肝脏中胆汁酸的代谢平衡。在CA诱导的胆汁淤积条件下,肝细胞中SIRT6的敲除未起到缓解或者加重胆汁淤积的作用,但SIRT6的敲除明显降低了转录因子FXR的蛋白水平,可能对其的表达存在一定的调控作用。