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目的本研究通过鉴定与不同分化程度人胃癌细胞株密切相关的miRNA，探讨了胃癌可能的发病机制；并初步分析丝裂霉素（MMC）对胃癌细胞miRNA表达谱的影响，为进一步探讨MMC治疗胃癌的分子机制奠定一定的理论基础。方法体外培养中分化人胃癌细胞株SGC-7901、低分化人胃癌细胞株MKN-45及正常胃粘膜上皮细胞GES-1，使用MTT法检测SGC-7901增殖情况，根据MTT的结果计算出MMC的IC50浓度来干预SGC-7901；提取各样本总RNA，并验证RNA质量，利用miRNA芯片技术，分别检测分析SGC-7901，MKN-45差异表达的miRNA，及用药物干预后SGC-7901差异表达的miRNA；采用实时定量RT-PCR对部分miRNA进行验证；运用DIANAmT，miRanda，miRDB，miRWalk，PICTAR4，PITA，RNA22，RNAhybrid及Targetscan软件预测miRNA-498可能调控的靶基因。结果1.与正常胃粘膜细胞GES-1相比，胃癌细胞株SGC-7901及MKN-45中有119个miRNA存在两倍及以上差异表达，其中SGC-7901有30个miRNA表达上调，25个miRNA表达下调；MKN-45有58个miRNA表达上调，33个miRNA表达下调;MKN-45与SGC-7901的miRNA表达谱有明显差异。2.MMC与SGC-7901细胞生长抑制率之间有浓度依赖关系，MMC48h的IC50为1.33μmol/L；MMC的IC50干预48h后的SGC-7901细胞与干预前SGC-7901细胞比较，存在60个差异表达的miRNA，其中miR-498、miR-1247等11个miRNA的表达明显上调，而在胃癌中的表达明显下调，另外miR-205*，miR-39242个明显下调的miRNA，在胃癌中的表达却是明显上调的。3.选取miR-33b，miR-498,miR-7,miR-185,miR-3924进行实时定量RT-PCR验证，其结果与芯片结果一致，证明miRNA芯片结果可靠。4．DIANAmT，miRanda，miRDB，miRWalk，PICTAR4，PITA，RNA22，RNAhybrid和Targetscan软件分析显示癌基因MDTH为miR-498的靶基因之一。结论1.胃癌细胞中存在差异表达的miRNA，且分化程度不同的胃癌细胞中亦存在差异表达的miRNA；2.MMC可以改变SGC-7901细胞中部分miRNA的表达水平；3.MMC对包括miR-498在内的这些miRNA的表达调控可能是其抑制胃癌细胞生长的途径之一