【摘 要】
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目的:目前,自体脂肪移植在整形美容外科发挥着日益重要的作用,不仅被广泛应用于面部年轻化等美容外科,同时,因其具有操作简便、创伤小、恢复快、易于推广、生物相容性好、来源丰富、填充效果好等显著优势,也被逐渐应用于填充组织凹陷等组织器官修复重建领域。然而,传统单纯脂肪采集及注射技术存在着高吸收率、低存活率等不足,特别在大范围体表组织缺损重建等需要较大量脂肪移植时,自体脂肪移植技术的不足又限制了其进一步应
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目的:目前,自体脂肪移植在整形美容外科发挥着日益重要的作用,不仅被广泛应用于面部年轻化等美容外科,同时,因其具有操作简便、创伤小、恢复快、易于推广、生物相容性好、来源丰富、填充效果好等显著优势,也被逐渐应用于填充组织凹陷等组织器官修复重建领域。然而,传统单纯脂肪采集及注射技术存在着高吸收率、低存活率等不足,特别在大范围体表组织缺损重建等需要较大量脂肪移植时,自体脂肪移植技术的不足又限制了其进一步应用和推广。为了更好推广自体脂肪移植技术在整形美容领域的应用,已经有许多方法被提出来用来提高脂肪移植物的存活率。其中干细胞在脂肪移植领域的再生作用得到多个研究的验证。但是,干细胞增殖分化调控机制尚未完全明确、存在转化为肿瘤细胞的风险,并且近来研究显示脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)主要通过旁分泌途径发挥作用。ADSCs可通过分泌外泌体(exosomes,EXOs)的方式携带可溶性因子,执行生物学功能。但细胞释放的EXOs数量非常少,且获取过程繁琐。克服这一缺点的一种策略是大规模制备细胞来源的纳米级囊泡。(exosome-mimetic nanovesicles,NVs)。本研究旨在对比人工制备纳米级NVs与EXOs在提高脂肪移植存活率效果的比较研究。方法:1.利用水动力抽脂方式获取人源性脂肪组织,通过酶解分离提取P4代hADSCs。行成脂成骨分化诱导和流式细胞鉴定。2.提取P4代hADSCs衍生的NVs和EXOs。利用电镜、NTA、纳米流式和zeta进行NVs和EXOs的形态、粒径大小、表面蛋白标记和zeta电位鉴定和比较。3.体外细胞实验:荧光标记NVs和EXOs,动态追踪NVs和EXOs内化到人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的过程。设置不同浓度梯度的NVs和EXOs,研究它们促进HUVECs增殖、迁移、血管形成的最适浓度。4.动物实验:创建裸鼠脂肪移植模型,以体外实验结果获得的最适浓度的NVs和EXOs分别与等量的水动力抽脂获得的脂肪组织混合,移植到裸鼠皮下。观察1、2、3月后处死裸鼠取出移植组织,进行体积及重量的称量对比,继而进行切片后H&E染色镜下观察移植组织内细胞形态完整性、空泡形成和纤维化表现;免疫组织化学染色(CD34、VEGF、Ki67)观察新生血管生成、增殖情况。结果:1.光学显微镜可见hADSCs呈细长纺锤状特征形态。油红O染色结果显示细胞中有大小不一的红色脂肪滴,茜素红染色可见特征性的大量红色着色区。hADSCs表面标记物表达CD29+/CD34+/CD90+/CD31-/CD45-。2.电镜结果显示NVs和EXOs均为球形双层膜结构,NTA粒径范围约为50-150nm,纳米流式分析CD9和CD81表达阳性,zeta电位为负值。3.体外实验我们发现NVs和EXOs在低浓度时,随浓度增高其促进HUVECs的增殖、迁移、血管形成能力越显著,当达到最适浓度后,继续增加浓度效果反而下降。NVs的最适浓度为60ug/m L,EXOs的最适浓度为40ug/m L。4.体内实验验证了NVs和EXOs能够有效提高脂肪移植存活率。且NVs和EXOs提高脂肪移植存活的机制主要与其促进新生血管形成有关。结论:NVs的形态、大小、膜结构与EXOs相似。在脂肪移植领域可以达到跟EXOs相当的效果。同时NVs产量高远远高于EXOs。因此,其有望替代EXOs用于脂肪移植领域,且对其他再生医学领域提供新的思路。
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【目的】探究不同胆囊干预策略下胆总管结石患者ERCP术后结石复发的概率以及相关危险因素,进一步阐明胆囊在胆总管结石复发中的作用。【方法】收集2015年01月-2018年01月首次因胆总管结石就诊于我院行ERCP取石治疗的患者共562例,排除合并胆道肿瘤、ERCP后结石残留、数据缺失以及失访的患者后,共355例,随访3年,其中复发者75例,未复发者280例,总复发率21.13%。将355例患者按照不
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目的经椎旁入路微通道显微椎管减压(paraspinal mini-tubular lumbar decompression,PMTD)技术与微创经椎间孔腰椎椎间融合(minimally invasive transforaminal lumbar interbody fusion,MIS-TLIF)技术均已广泛应用于治疗I度退变性腰椎滑脱伴腰椎管狭窄症,但二者手术方式与手术理念各有优势,关于PMT
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目的:了解漏斗胸经Nuss手术治疗后胸椎侧弯度的改变情况,为选择Nuss手术时机和早期诊治Nuss术后胸椎畸形变化提供参考。方法:以2013至2018年于福建医科大学附属第一医院接受Nuss手术治疗总共95例漏斗胸患者作为研究对象,根据手术前年龄是否大于12岁将患者分为早期手术组与晚期手术组;根据手术前是否合并有脊柱侧弯(Cobb角≥10°)将患者分为脊柱侧弯组与非脊柱侧弯组;根据漏斗胸严重程度将
目的:了解2型糖尿病(T2DM)患者肌少症与动脉硬化的关系,并对糖尿病患者的动脉硬化发病率进行临床预测模型建模。方法:回顾性研究了福建医科大学附属第一医院住院T2DM病人1355人,男性709例,女性646例,平均年龄为61.87±12.30岁。所有入选对象均完善了一般信息的收集,并根据亚洲肌少症诊断标准,利用双能X线吸收测定法(DXA)所得到的肌少症指数(Appendicular skeleta
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目的:评价右美托咪定辅助镇静对行椎管内麻醉患者术后睡眠质量的影响。方法:择期行椎管内麻醉下大隐静脉高位结扎和剥脱术的患者51例,ASA(American Society of Anesthesiologists,美国麻醉医师协会)I~II级,使用随机数字表法将患者分成右美托咪定组(n1=25)和对照组(n2=26)。待麻醉平稳后,右美托咪定组开始予右美托咪定6μg·kg-1·h-1速率静脉泵注10
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