H5N1亚型禽流感病毒感染家鸭脑组织蛋白质组学差异分析

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水禽是流感病毒的自然宿主,目前已知的血清亚型都能从水禽中分离到。早期分离到的禽流感病毒并不能引起水禽产生明显的病理症状,但相同的毒株感染鸡后可能会造成大规模的死亡。2002年后,出现了能够致死水禽的H5N1亚型高致病性禽流感毒株。2005年,中国青海湖地区暴发了禽流感疫情并在随后的几年中该地区毒株迅速传播到整个欧亚大陆,揭示候鸟可能在禽流感病毒的传播过程中扮演重要角色。家鸭目前是目前分布范围较广、养殖量较大的水禽类动物。在活禽市场中,从鸭体内分离出的H5N1亚型禽流感病毒许多能够导致鸡类的大规模死亡。家鸭的分布密度与禽流感病毒的分布范围密切相关,家鸭可能在禽流感病毒在鸡群中的传播以及高致病性禽流感感染人的过程起到重要作用。已知的高致病性禽流感感染人的事件中大多数都是人与禽类直接接触造成的。目前,禽流感感染哺乳动物和人的分子机制的研究已经较为深入。鉴定出了许多能够显著改变流感病毒对哺乳动物感染能力和致病力的氨基酸位点。但在H5N1亚型高致病性禽流感获得对水禽高致病能力方面的研究较少。高致病性禽流感感染家鸭后引起组织的蛋白水平的改变情况目前仍不清楚。本实验使用能够对家鸭高度致死性的H5N1亚型禽流感病毒GS/HB65-PA224P+383D感染家鸭,研究高致病性禽流感病毒感染家鸭后引起的蛋白水平上的改变。由于该病毒能够感染家鸭的脑组织,并引起家鸭产生明显的神经症状。鸭脑组织是研究禽流感病毒引起家鸭神经症状产生机制较为理想的靶器官。本研究通过人工感染家鸭,72h后分别将攻毒组和对照组的家鸭脑组织进行双向电泳分析,然后利用专业的软件寻找感染后家鸭脑组织表达水平显著改变的蛋白点。结果共鉴定出16个蛋白差异点,其中10个为蛋白表达水平上调点,6个为蛋白表达水平下调点。然后对这些蛋白点进行了质谱鉴定,共鉴定出12个蛋白点共计10种蛋白质。其中包括异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase3alpha subunit)、T-complex protein1(TCP1)、complexin-1和丝/苏氨酸蛋白磷酸酶2A催化亚基α单体(PPP2Ac)等蛋白。这些蛋白主要是参与能量代谢、蛋白折叠、信号传导及蛋白修饰等生命过程。该研究为进一步研究禽流感病毒对水禽的致病机理提供了一定的参考依据。
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