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目的:多发性骨髓瘤是一种恶性血液肿瘤近几年其发病率逐渐增高,而随着疾病的进展给患者带来极大的痛苦,当前治疗方法有限。由于化疗药的联合应用,极易产生多发耐药。多发耐药一旦产生,患者大多预后不良。因此,我们不断寻求新的治疗方法,细胞免疫疗法CAR-T技术其实就是将目的基因植入病毒载体内然后将病毒转入患者的T细胞使其表达特定的抗体。在前期研究中发现单链可变片断(SCFV)取代了细胞外的抗原结合域使得TCR发生了改变,这样就使CAR-T具有MHC非限制性识别的优点,让其更好地发挥识别和抗肿瘤细胞的作用。特别是一些研究发现CD19-CAR-T在CD19阳性B细胞恶性肿瘤上取得了很好的效果。而CD138是一个表面蛋白,它的作用是当作粘附分子结合细胞外基质分子的胶原蛋白和纤维连接蛋白。CD138在骨髓瘤细胞表面高表达,但是几乎不表达于其他的造血细胞,包括T细胞和B细胞。因此,CD138成为了一个用CAR-T疗法治疗多发性骨髓瘤很好的靶点。基于以上设计了本实验。我们研究的主要目的是探讨细胞免疫疗法CD138-CAR-T对于多发性骨髓瘤细胞普通株RPMI8226的杀伤作用,以及对耐药株MM1R的杀伤作用。评估CD138分子作为细胞疗法CAR-T靶点的效果。方法:构建携带有CD138抗体的慢病毒以及未携带目的基因的慢病毒,然后分离提取人的T淋巴细胞,将慢病毒转入T淋巴细胞构建成CD138-CAR-T和携带空病毒的T细胞。然后用流式细胞术检测CD138-CAR-T的转染效率,检测多发性骨髓瘤普通株RPMI8226、耐药株MM1R及阴性对照细胞293T细胞表面CD138分子的表达水平,流式细胞术检测CD138-CAR-T和携带空病毒的T细胞在效靶比为10:1和1:1时分别对多发性骨髓瘤普通株RPMI8226,耐药株MM1R以及CD138阴性对照细胞株293T细胞的杀伤作用。结果:CD138-CAR转染至T细胞的效率为46.25%,RPMI8226细胞表面CD138表达量较高而MM1R细胞表面表达量较低,因此为探究CAR-T细胞对于多发性骨髓瘤耐药株CD138高表达与低表达的作用我们又将MM1R CD138阳性细胞分选出来培养提高其阳性率。293T细胞表面CD138基本不表达。对于RPMI8226和分选后的MM1R来说,CD138-CAR-T组比携带空病毒的T细胞组杀伤作用强。而对于分选前的MM1R及293T细胞来说,CD138-CAR-T组与携带空病毒的T细胞组杀伤作用无明显差别。同时分选后的MM1R细胞组CD138-CAR-T杀伤作用显著强于未分选MM1R细胞组。并且在效靶比为10:1时杀伤作用要好于效靶比1:1时。对于293T细胞组来说CD138-CAR-T组与对照T细胞组无显著统计学差异。结论:CD138-CAR-T对于肿瘤细胞表面CD138阳性的多发性骨髓瘤普通株RPMI8226和耐药株MM1R均有显著的杀伤作用,而对于CD138阴性细胞株293T则没有显著的杀伤作用,因此不论耐药株还是普通株其杀伤作用的好坏依赖于细胞表面CD138分泌水平的高低,分泌水平高杀伤作用好。