【摘 要】
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目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)表面蛋白高变区-1(hypervariable region,HVR1)的变异规律和发生机制.方法:连续4年,每年2次随访4名丙型肝炎患者.用测序法和异双体动态分析法(het
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目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)表面蛋白高变区-1(hypervariable region,HVR1)的变异规律和发生机制.方法:连续4年,每年2次随访4名丙型肝炎患者.用测序法和异双体动态分析法(heteroduplexs mobility analysis,HMA)检测上述患者丙型肝炎病毒5UTR片段,分析各自的基因型;用单链多态性分析法(single-strand conformation polymorphism,SSCP)检测其HVR1片段的多态性;RNA定量分析法(lightcycler)检测每次患者病毒量的动态变化;克隆并在大肠杆菌表达HVR1片段,用Western Blot分析有无HVR1片段的抗体;在HVR1片段测序的基础上,分析枋苷酸、氨基酸序列的变异位点.通过上述检查,观察基因型、病毒量和抗体水平对丙型肝炎病毒表面蛋白高变区发生变异有何影响.结果:基因型检测多为单一感染,仅患者1为混合感染(即为1a和3a的混合感染).多态性和病毒量检查发现,惟有患者3的HVR1多态性最明显,病毒量波动显著且持续在高水平,核苷酸和氨基酸序列变异突出.患者4的HVR1抗体始终阴性,余为阳性.所有病人HVR1的第2、6、7、20、23和26位的氨基酸彼此相同,始终未发生改变.第4、5、8、10、11、13、17、和21位均为中性氨基酸,第16和19位氨基酸为含疏水基团的氨基酸,但彼此可互换,其他位点氨基酸的变化没有明显规律.结论:基因型与HVR1的变异无明显关系;HVR1抗体阳性,HVR1变异显著;病毒量骤升常导致HVR1变异.HVR1的变异主要是免疫逃逸的结果,但不能排除核苷酸漂移.HVR1的氨基酸序列变化也存在着一些规律.
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