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马疱疹病毒1型（Equine Herpes Virus1，EHV-1）属于α-疱疹病毒，主要感染马属动物，引起以呼吸道症状为主并伴随着发烧、淋巴细胞增多或母马妊娠晚期流产和死胎等症状的传染病。EHV-1造成对机体的潜伏感染，当机体免疫力降低时出现病毒血症和神经症状。胸腺激酶（Thymidine Kinase，TK）基因是EHV-1主要毒力基因，缺失T K基因影响疱疹病毒在神经元中的复制能力。TK基因属于病毒的早期基因,其编码产物胸苷激酶是胸腺嘧啶合成补救途径中所必需的酶。TK功能缺失的毒株在非分裂细胞中的复制能力非常低，使得神经潜伏病毒的毒力难以恢复，因而在TK对神经致病性的研究中具有特殊意义。UL24为EHV-1的早期基因，缺失UL24同样影响病毒在神经细胞中的生长。已有研究证明疱疹病毒TK基因启动子位于UL24基因内部，但并未确定TK启动子的确定区域。本实验根据已知的疱疹病毒TK基因启动子基因特性预测EHV-1TK启动子区域，并辅助软件分析，预测可能的启动区域与调控元件。基于预测结果在TK基因上游序列设计克隆出5条不同长度的基因片段，同时构建不含启动子区域的GFP载体，将上述TK基因上游片段亚克隆到GFP的5′UTR区域，构建启动子活性预测系统；对已构建载完成的5种启动子检测系统体进行细胞转染，用荧光显微镜与流式细胞仪进行GFP表达检测；根据已知预测片段的启动活性的结果，用软件Bioinformatics and Molecular Analysis Section进行调控元件对比分析。结论：确定3个区域具有启动子活性，分别位于UL24基因3′端-266~+814、-100~-1、-49~-1区域，同时-266~+814区域的启动活性强于-100~-1区域，-100~-1区域与-49~-1区域启动活性相同；2个不具有启动子活性区域，分别位于UL24基因3′端1～998和5′端958～1045区域，预测UL24基因3′端1～998区域可能具有未知的转录调控抑制元件；EHV-1的TK基因调控原元件中，TATAA和GCCCC调控元件为重要调控元件，但是TATAA并不是必须元件，GCCCC区域独自存在仍具有启动子活性。本研究为深入研究TK基因转录表达控制及其神经致病机理等研究提供了基本的数据。