论文部分内容阅读
目的探讨姜黄素对酒精联合四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用,并初步探讨其机制。方法制备小鼠急性肝损伤模型。健康雄性BALB/C小鼠50只,随机分成5组,每组10只。正常对照组腹腔注射橄榄油,尾静脉注射PBS,葡萄糖灌胃。四氯化碳模型组,腹腔注射四氯化碳(CCl4),尾静脉注射PBS,葡萄糖灌胃。酒精联合四氯化碳模型组,腹腔注射四氯化碳(CCl4),尾静脉注射PBS,酒精灌胃。低剂量姜黄素给药组腹腔注射四氯化碳(CCl4),尾静脉注射1×10-4M姜黄素,酒精灌胃。高剂量姜黄素给药组腹腔注射四氯化碳(CC14),尾静脉注射3×10-4M姜黄素,酒精灌胃。给药两个星期后,检测生化指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(Alb)以及总胆红素(TBIL)在动物模型体内的变化；利用HE染色法和Masson三色染色法观察肝组织病理学变化；利用Western Blot技术检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平；利用免疫荧光染色法观察CHOP的表达；透射电子显微镜观察肝细胞超微结构。结果成功建立肝损伤模型,单纯四氯化碳模型组与对照组相比小鼠血清中AST、ALT、TBIL含量显著增高(P<0.05),Alb含量显著降低(P<0.05)；HE染色和Masson三色染色表明,肝脏损伤；Western Blot结果显示肝组织中TNF-α、 TGF-β和α-SMA的表达增强。酒精联合四氯化碳组与对照组和四氯化碳模型组相比小鼠血清中AST、ALT、TBIL含量显著增高(P<0.05),Alb含量显著降低(P<0.05)；HE染色和Masson三色染色表明,肝脏损伤十分严重,出现纤维隔；Western Blot结果显示肝组织中TNF-α、TGF-β和α-SMA的表达程度更强。高剂量姜黄素给药组中,AST、ALT、TBIL含量明显降低并且抑制了胶原纤维的形成；肝脏组织中蛋白TNF-α、TGF-β和α-SMA的表达与模型组相比明显减少。低剂量姜黄素给药组与酒精联合四氯化碳模型组相比效果不明显。荧光免疫组化结果显示,酒精联合四氯化碳模型组CHOP表达量很高,高剂量姜黄素显著抑制了CHOP表达量。电子显微镜结果显示,酒精联合四氯化碳模型组内质网损伤严重,高剂量姜黄素改善了内质网损伤情况。结论姜黄素通过减少TNF-α、TGF-β和α-SMA的表达而减少HSC的激活和EMC的产生,从而减轻或阻止肝纤维化的发展。并且姜黄素通过降低内质网压力,保护内质网,对酒精联合四氯化碳诱导的肝损伤起到保护作用。