铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)为条件致病菌，广泛分布于自然界和人体皮肤、肠道和呼吸道等处，某些导致宿主免疫功能受损的因素，如应用激素免疫抑制剂、肿瘤化疗、放射化疗、创伤及烧伤均易引起铜绿假单胞菌感染。近年来，铜绿假单胞菌导致的感染日益增多、耐药性日益增强，已成为条件致病菌的代表菌，引起了人们的极大重视。全国性革兰氏阴性菌耐药监测(NPRS)数据显示，从2000年到2005年，铜绿假单胞菌在所有院内感染革兰阴性菌中排第1位。从NPRS数据可以看出，6年间，铜绿假单胞菌对几乎所有抗铜绿假单胞菌抗生素的敏感性都在下降。铜绿假单胞菌耐药率的增加，给临床治疗带来极大困难。因此可以看出铜绿假单胞菌耐药谱较广，耐药质粒和AmpC酶在铜绿假单胞菌耐药性的产生和传播具有重要的地位。耐药谱分析、耐药质粒的鉴定和AmpC酶的检测既具有重要的流行病学意义，又对深入研究铜绿假单胞菌的耐药机制具有重要价值。本研究对铜绿假单胞菌的临床不同感染性标本进行分离鉴定，对所分离的铜绿假单胞菌株进行耐药性测定，分析铜绿假单胞菌常见的耐药谱，从而揭示其对抗生素有天然耐药性，并呈多重耐药现象。本实验同时运用分子生物学方法对一些代表菌株进行耐药质粒鉴定和AmpC酶的检测，为深入研究铜绿假单胞菌的耐药机制提供第一手资料，以期为减少铜绿假单胞菌感染的发生、提高医疗质量、改善患者预后提供重要信息。本实验工作包括以下四个方面：1．铜绿假单胞菌的分离鉴定。2．铜绿假单胞菌耐药性检测，分析细菌的耐药谱。3．铜绿假单胞菌耐氨苄青霉素质粒的提取和鉴定。4．铜绿假单胞菌AmpC酶的检测。