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目的:应用经过TERT基因修饰的溶瘤腺病毒,感染并在肿瘤细胞内高活性的复制,最终导致肿瘤溶解死亡。作为一种新型恶性神经胶质瘤的治疗方法,探讨其在体内外的抑制肿瘤的作用效果,为进一步的临床研究提供实验依据。 方法: 传代培养人胶质瘤细胞 U87、U251N、U343。通过体外的溶瘤细胞实验(Oncolytic assay)、细胞凋亡检测实验(TUNEL assay),来证实溶瘤腺病毒对于恶性胶质瘤细胞的杀伤作用。并且,通过观察病毒复制实验来判断不同基因型的溶瘤腺病毒在肿瘤细胞内的复制情况。最后通过建立U87裸鼠移植瘤模型,瘤内注射溶瘤腺病毒,应用HE染色,肿瘤体积变化分析测定等方法,观测溶瘤腺病毒对裸鼠移植瘤的抑制作用。 结果: 建立以TERT为启动子的重组溶瘤腺病毒Ad-TERT。证实Ad-TERT可以在体外抑制恶性神经胶质瘤,产生较高的细胞毒性,并且在恶性神经胶质瘤细胞内大量繁殖。Ad-TERT在裸鼠恶性神经胶质瘤模型内大量繁殖,并杀伤肿瘤细胞,使肿瘤组织坏死缩小。 结论: 1.溶瘤腺病毒通过TERT启动子修饰后,在体外对恶性神经胶质瘤细胞有很好的抑制及杀伤作用。在体内也有很好的抑制肿瘤生长,缩小肿瘤的治疗效果。 2.溶瘤腺病毒通过TERT启动子修饰后,比之其他基因重组型溶瘤腺病毒有更好的体内外抗肿瘤效果、复制活性高、安全性好等优点。