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目的：牙周炎是累及牙周支持组织的炎症性、破坏性疾病，主要临床表现有牙周袋形成，牙周附着丧失和牙槽骨吸收。牙周炎的患病率及严重程度随年龄增高而增加。口腔流行病学调查结果显示,牙周炎已成为我国成年人牙齿丧失的首位原因，严重影响患者的咀嚼功能和牙周美观。医学研究表明牙周炎与多种全身性疾病相互关联，牙周炎对血脂、血糖水平的影响可能是增加心血管疾病、糖尿病等系统疾病发病机率的重要原因[1]。在牙周炎的临床治疗方面，传统的局部、全身药物及牙周基础治疗可以控制牙龈炎症，改善牙周状态，但对于牙周组织的重建收效甚微，因此，如何使已破坏和丧失的牙周组织修复和再生，恢复牙周的美观外形和正常的咀嚼功能成为临床上亟需解决的问题。牙周组织工程技术的出现为实现牙周组织的修复再生提供了全新的思路。牙周组织工程是利用生命科学和生物材料学的原理、方法和技术重建新的具备原有形态和功能的牙周组织，达到修复和再生的目的，其包含种子细胞、支架材料与生长因子三大基本要素。本研究选用中药双黄补作为生长因子，将牙龈成纤维细胞作为种子细胞与玉米醇溶蛋白支架材料结合，应用于动物人工骨缺损模型中，观察牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白-双黄补复合体在牙周组织工程应用中对牙周组织修复的影响，研究其促进牙周组织再生的病理生理机制，为中药在牙周组织工程的开发和应用提供理论依据。方法：以2只Beagle犬双侧上颌5445、下颌743347共20个牙位作为实验部位，将其配对分为四组，每组5个牙位分别制备骨缺损模型，实验组Ⅰ：翻瓣术+玉米醇溶蛋白支架植入,实验组Ⅱ：翻瓣术+牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白支架植入,实验组Ⅲ：翻瓣术+牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白-中药双黄补复合体植入,对照组：单纯翻瓣术。于术后3个月获取标本，根据锥形束CT检查、组织学测量指标（骨缺损高度、新生牙槽骨高度、新生牙骨质高度、结合上皮长度）以及免疫组化染色半定量分析骨形成蛋白-2(Bone morphogenetic proteins-2,BMP-2)及骨唾液蛋白(Bonesialoprotein,BSP)的表达，研究牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白-双黄补复合体促进牙周组织再生的作用和机制。结果：1组织学观察术后3个月光学显微镜下观察，实验组Ⅰ、Ⅱ及对照组牙龈区及牙周膜均可见炎细胞浸润，实验组Ⅲ未见明显炎症细胞；实验组Ⅰ骨缺损区显示新骨及牙骨质生成，骨小梁纤细，围绕大量的纤维组织；实验组Ⅱ可见片状新骨结构，骨缺损边缘成骨细胞成行排列，牙周膜内新生血管数目较多；实验组Ⅲ显示大量渐趋成熟的新骨组织，可见哈弗氏系统；对照组缺损区以纤维化骨为主，可见成骨细胞及成牙骨质细胞。四组均有明显结合上皮根移。2组织学测量结果实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ术后3个月新生牙槽骨分别为1.02±0.09mm、1.03±0.06mm和1.14±0.07mm，均高于对照组新生牙槽骨高度测量值0.96±0.06mm (P <0.05)，其中实验组Ⅲ新骨生成效果更显着(P <0.01)。实验组Ⅲ新生牙骨质高度为1.00±0.08mm，高于对照组新生牙骨质高度测量值0.91±0.10mm (P <0.05)；而术后四组的结合上皮长度值差异无显着性意义(P>0.05)。3锥形束CT检查锥形束CT检查实验组Ⅰ骨缺损区有新骨形成，边缘模糊，与周围骨组织逐渐融合；实验组Ⅱ显示骨缺损区可见点片状密度较高的影像；实验组Ⅲ显示骨缺损区大量新骨生成，缺损边缘皮质骨连续，呈现明显的阻射影；对照组骨缺损区面积缩小，低密度影较各实验组多。实验组成骨较对照组多，且实验组Ⅲ较实验组Ⅰ、Ⅱ高密度影增多。4牙槽骨骨密度测量结果实验组Ⅱ、Ⅲ牙槽骨骨密度的差值百分比低于对照组的骨密度差值百分比(P<0.05)，且实验组Ⅲ的骨密度的差值百分比低于实验组Ⅱ对应值(P<0.05)，而实验组Ⅰ与对照组的差值百分比差异无统计学意义(P>0.05)。5免疫组化结果骨形成蛋白-2阳性表达定位于胞浆，以胞浆中出现棕黄色颗粒或团块者为阳性细胞。四组中骨形成蛋白-2均有阳性表达，新生牙槽骨周围可见成骨细胞阳性着色，新生牙骨质边缘的成牙骨质细胞也为阳性着色；实验组Ⅱ、Ⅲ的BMP-2表达为中度阳性，明显高于对照组弱阳性(P<0.05)，实验组Ⅰ的BMP-2阳性细胞数略高于对照组，差异无统计学意义(P>0.05)。骨唾液蛋白阳性表达于胞浆，呈棕黄色着色。四组中骨唾液蛋白均有阳性表达,成牙骨质细胞、成骨细胞胞浆中可见棕黄色颗粒或团块。与空白对照组相比，实验组Ⅱ、Ⅲ的骨唾液蛋白中度阳性表达，阳性细胞数明显增高(P <0.05)，实验组Ⅰ与对照组均为弱阳性，阳性细胞数比较无显著性差异(P>0.05)。结论：1牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白-双黄补复合体可能通过促进牙龈成纤维细胞增殖继而向成骨细胞分化，加快骨基质的形成和成熟，从而促进牙周组织的再生。2牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白-双黄补复合体能促进BMP-2和BSP在牙周组织中的表达，促进新生牙槽骨和牙骨质的生成。3中药双黄补有明显抑菌、控制牙周炎症的作用。