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假体周围骨溶解以及并发的无菌性松动是全关节置换术后最常见的长期并发症,目前没有有效的预防和治疗方法。对骨溶解最终引起的置入假体松动,现在仍然采用翻修手术,但与初次置换手术相比效果较差,假体寿命更短。因此,针对骨溶解发病机制探讨有效的预防措施和替代疗法,有重要的现实意义。大量研究表明假体磨损碎屑诱发的生物学反应是引起骨溶解的主要原因。改进假体材料和优化假体设计并不能彻底消除磨损颗粒产生,而且对已经发生的骨溶解没有治疗意义。随着RANKL/RANK/OPG系统在骨溶解进程中的作用逐渐明晰,OPG显示出极大的治疗潜力。但应用外源性OPG蛋白存在诸多缺点,间接体内法（ex vivo）基因治疗越来越受到关注。本研究建立钛颗粒诱导的骨溶解动物模型,对OPG基因治疗作用进行探讨。 目的 构建pcDNA3.1-OPG-IRES-EGFP真核表达载体。获得稳定表达OPG的细胞株。通过细胞移植证实OPG间接体内法（ex vivo）基因治疗抑制颗粒诱导骨溶解的有效性,为临床上预防和治疗骨吸收疾患提供实验依据。 材料和方法 1.从人骨肉瘤细胞株（MG63）内提取mRNA,根据半巢式PCR原理设计引物,利用RT-PCR方法扩增OPG全长基因核苷酸序列。克隆入测序载体pGEM-T Easy后进行测序。 2.应用基因重组方法,采用定向克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1OPG-IRES-EGFP。应用PCR技术和限制性内切酶对载体进行鉴定。 3.LipofectamineTM2000介导下用重组质粒和pcDNA3.1（+）分别转染小鼠成肌细胞株C2C12,经G418压力筛选,借助荧光显微镜观察,获取稳定转染细胞株。荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光表达情况,ELISA方法检测细胞培养上清中OPG含量。 4.建立牛骨片-破骨细胞培养体系,用转染细胞培养上清分别作用,甲