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目的：肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）是一种高发病率的医学性难题，是多种慢性肝病演进、发展的共同病理过程，其演变结果为肝硬化。目前，普遍认为肝硬化是不可逆转的，而肝纤维化是可以逆转的。故而寻求抗肝纤维化的有效药物，成为当今治疗肝病的研究重点。临床上现治疗肝纤维化方面尚缺乏公认有效的手段，而中医药凭借多层次、多靶点的治疗特点显示了其独特的疗效。导师李佃贵教授首次提出并创立“浊毒”理论，经多年的临床实践，李教授认为“浊毒”是肝纤维化形成的关键因素，以化浊解毒法为治疗原则组方取得了满意的临床效果，但化浊解毒方的作用机制尚不明确。目前证实，肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）是致肝纤维化的主要细胞，血小板衍生生长因子（Platelet derived growth factor,PDGF）是目前已知的对HSC作用最强的有丝分裂原。JAK激酶/信号转导和转录激活子通路（janus kinase/signal transducer and activator oftranscription,JAK/STAT）是多种细胞因子的传导通路，与肝纤维化形成过程密切相关。本实验通过观察化浊解毒方对PDGF-BB、JAK2/STAT3的表达情况，来判断其对大鼠肝纤维化的干预作用,进而探讨化浊解毒方对肝纤维化的可能作用机制，为化浊解毒方治疗肝纤维化提供现代药理学靶点，从以方测证的角度为化浊解毒法提供分子生物学依据。方法：清洁级SD雄性大鼠70只，体重200±20g，适应性喂养一周后随机分为6组。即：正常对照组（N），n=10只；模型对照组（DMN），n=20只；化浊解毒方高剂量组（H），n=10只、化浊解毒方中剂量组（M），n=10只、化浊解毒方低剂量组（L），n=10只；复方鳖甲软肝片组（BJ），n=10只,各组大鼠均正常饮食。除正常对照组外,各组大鼠均于每周一上午开始予腹腔内注射10mg/kg的1%DMN，1次/天。实验第1周连续造模3天；第2到6周，每周连续造模2天；在造模的第2、4周末分别处死模型组大鼠4只，观察肝组织及病理切片纤维化程度，至第4周末,大鼠中度肝纤维化模型建成；第5到8周，每天等体积灌胃给与不同药物。第8周末，所有大鼠处死并取新鲜肝组织，运用苏木精-伊红染色观察肝组织病理情况；运用RT-PCR法检测肝组织中PDGF-BB、JAK2/STAT3mRNA的表达情况。结果：1各组大鼠的一般情况实验期间，模型对照组大鼠死亡3只，给予高剂量化浊解毒方的大鼠死亡2只，余组大鼠无死亡情况。正常对照组大鼠一般情况好，进食正常，活动敏捷，毛色有光泽，体重稳步增加，大便呈颗粒状。其余各组大鼠均有不同程度的进食减少，精神萎靡、嗜睡，皮毛晦暗，体重减轻，便溏。2肝组织及病理学情况观察肉眼观察正常对照组大鼠肝脏表面光滑、质韧，色鲜红；模型对照组大鼠肝脏表面有颗粒状结节，质硬，色晦暗；中剂量化浊解毒方受试大鼠肝脏表面散在细砂粒样结节，质稍硬，色暗红。HE染色情况显示：正常对照组大鼠肝小叶结构完整，肝索排列整齐；模型组肝小叶结构破坏明显，纤维组织增粗、分割肝小叶；给予中剂量化浊解毒方的大鼠较模型组肝小叶结构破坏明显减轻，纤维条索变细。3RT-PCR结果3.1PDGF-BB mRNA表达：正常对照组中可以检测到少量PDGF-BBmRNA的表达。与正常对照组比较，模型对照组PDGF-BB mRNA的表达显著增加（P <0.01）；复方鳖甲软肝片组及低剂量的化浊解毒方PDGF-BB mRNA水平均较模型对照组降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；中剂量的化浊解毒方与模型对照组相比，PDGF-BB显著降低，差异具有显著统计学意义（P <0.01）；高剂量的化浊解毒方和模型对照组比较，PDGF-BB mRNA的表达差异无统计学意义（P>0.05）。3.2JAK2mRNA表达：正常对照组中可以检测到少量JAK2mRNA的表达。与正常对照组对比，模型对照组JAK2mRNA的表达显著增加（P <0.01）；低剂量的化浊解毒方JAK2mRNA水平均较模型对照组降低，差异具有统计学意义（P <0.05）；复方鳖甲软肝片组及中剂量的化浊解毒方与模型对照组相比JAK2mRNA显著降低，差异具有显著统计学意义（P <0.01）；高剂量的化浊解毒方和模型对照组比较，JAK2mRNA的表达与模型组均处于较高水平表达，差异无统计学意义。3.3STAT3mRNA的表达：正常对照组中有少量STAT3mRNA的表达。与正常对照组相比，模型对照组STAT3mRNA的表达显著增加（P<0.01）。复方鳖甲软肝片组STAT3mRNA的水平较模型组降低，差异具有统计学意义（P <0.05）；其它组较模型对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：1在DMN致大鼠肝纤维化的模型中，细胞因子PDGF-BB及信号转导通路JAK2/STAT3表达上调，是参与形成肝纤维化的机制之一。2化浊解毒方能够改善DMN所致大鼠肝纤维化的程度，降低大鼠肝组织中PDGF-BB和JAK2的mRNA表达，具有抗DMN致肝纤维化的作用，且以中剂量效果最为显著。3化浊解毒方通过降低肝纤维化大鼠肝组织中PDGF-BB和JAK2的mRNA表达，从而调节JAK/STAT通路，可能是其发挥抗肝纤维化的作用机制之一。