雪菊黄酮提取与分离纯化工艺技术研究

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本实验以高原雪菊为材料,研究雪菊中黄酮类化合物的最佳提取工艺,采用大孔吸附树脂分离纯化在最佳工艺下得到的雪菊中黄酮,对分离纯化后的雪菊提取液进行冷冻干燥,得到的产品通过高速逆流液相色谱仪(HSCCC)进行进一步分离纯化,得到纯度较高的三种黄酮单体化合物。为雪菊的进一步开发和利用提供理论依据及技术支持。1雪菊中黄酮类化合物提取工艺研究以雪菊为原料,将原料粉碎烘干后采用乙醇回流提取法提取雪菊中黄酮类物质,用95%芦丁作为标准品,选择510nm为检测波长,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法测定雪菊提取液中的总黄酮含量,结果显示本方法适用于雪菊中黄酮类物质的检测。单因素实验和正交实验结果表明,影响雪菊中黄酮类化合物提取率因素大小为:乙醇浓度>提取温度>固液比>提取时间。雪菊中总黄酮的最佳提取工艺条件为:60%乙醇为提取溶剂,提取时间60min,提取温度90℃,固液比1:40,以该工艺制备得到雪菊中黄酮的提取率为11.23%。2大孔吸附树脂对雪菊黄酮的分离纯化工艺研究本文以雪菊为原料,采用大孔吸附树脂对雪菊中黄酮的分离纯化工艺条件进行了研究。考察了6种树脂对雪菊中黄酮类化合物的吸附分离性能,确定大孔吸附树脂分离雪菊中黄酮类化合物的工艺条件。结果表明NKA-2树脂对雪菊黄酮具有良好的吸附分离性能,湿树脂的静态饱和吸附量为128.85mg/mL,解吸率达到88.58%。上柱吸附条件为:料液黄酮浓度为3.66mg/mL,上样量为6BV,pH值3-4.2,流速3BV/h;洗脱条件为:60%乙醇,洗脱量6BV,流速3BV/h。在该纯化条件下,总黄酮纯度提高到82.83%,样品得率为16.70%,黄酮提取率为72.83%。NKA-2树脂对雪菊总黄酮的纯化效果好,成本低,可适用于工业大规模生产。3高速逆流液相色谱法分离雪菊中黄酮应用高速逆流色谱分离纯化雪菊花中的组分。以1%冰醋酸水-正丁醇-乙酸乙酯(4:1:34,v/v)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0ml/min,主机转速850r/min,分离温度25℃,检测波长280nm,上样量200mg。分离得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种化合物,经液相峰面积归一法检测,其纯度分别为94.14%、98.90%、94.40%。
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