西地那非对兔自体原位肺移植模型肺缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

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目的:采用兔自体原位肺移植模型,探讨西地那非在肺移植模型中对肺缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法:选用健康成年家兔20只,体重2.5-3.0Kg(由江苏大学医学院动物实验中心提供),随机分为对照组和西地那非组两组,每组10只。建立兔自体原位肺移植模型,两组分别用低钾右旋糖酐液(LPD液)和含有0.7mg/L西地那非的LPD液(LPS液)作肺灌注及保存。各组分别于缺血前、再灌注1h、2h取左下肺静脉血作血气分析检测血氧分压(PvO2);各组分别于缺血前、再灌注0.5h、1h、1.5h、2h取左下肺静脉血,离心,取上清夜,超低温冰箱保存,待集中检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性;于再灌注2h时取肺组织标本制成100 g/L的组织匀浆,离心,取上清液超低温冰箱保存,待集中检测丙二醛(MDA)含量、髓过氧化酶(MPO)活性;术毕取左下肺相同部位肺组织约0.5g,称湿重,70℃烘干48h称干重,计算肺组织湿/干重比(W/D);另取两块左下肺相同部位肺组织光镜、透射电镜下观察组织形态结构变化。结果1.肺静脉血氧分压比较:再灌注后各时点PvO2均较缺血前下降,但西地那非组PvO2明显高于同时点对照组,两组结果有统计学意义。(P<0.05)。2.MDA含量,SOD活性:再灌注后MDA值,西地那非组明显低于对照组;两组再灌注后各时点SOD的活性均较缺血前下降,但西地那非组明显高于同时点对照组,两组结果均有统计学意义(P<0.05)。3.MPO及iNOS活性:两组再灌注后各时点iNOS表达均较缺血前升高,但西地那非组明显低于同时点对照组;再灌注后MPO活性,西地那非组明显低于同时点对照组,两组结果均有统计学意义(P<0.05)。4.肺组织湿/干重比:对照组与西地那非组兔肺组织湿/干重比比较显示,对照组高于西地那非组,有统计学意义(P<0.05)。5.光镜下肺组织病理改变:西地那非组肺组织泡壁轻度增宽,血管内皮完整,血管内有血细胞,对照组肺组织肺泡壁增宽,伴有散在的纤维蛋白沉积,血管内皮完整,有大量的中性粒细胞浸润,可见较多的肺泡吞噬细胞,常伴有中性粒细胞的聚集。6.电镜下肺组织病理改变:西地那非组大部分肺泡组织结构正常,Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮细胞大致正常,部分肺泡上皮细胞水肿脱落。表面绒毛尚可见,板层小体亦较多见,肺泡腔基本通畅,但少数肺泡腔内有红细胞渗出,部分区域毛细血管内红细胞堆积,可见到少量的炎性细胞浸润;对照组肺泡间隔内毛细血管淤血明显,血管扩张,肺泡腔内红细胞漏出明显,成堆分布,伴纤维素渗出,可见中性粒细胞浸润,伴少量单核细胞,有的肺泡上皮水肿、脱落致肺泡壁变薄、断裂,部分上皮细胞自溶。Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮细胞及胞浆内的板层小体排空。结论:在兔自体原位肺移植模型中,西地那非有较强的抗氧化能力,能够提高机体清除氧自由基能力;有一定的抗炎能力,能减弱炎症反应。从而对自体原位肺移植模型的再灌注损伤有一定的保护作用,西地那非作为肺保护液添加剂有利于兔自体原位肺移植模型的肺保护。
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