第一部分 用touch-downPCR从人肝组织cDNA中克隆了碱性成纤维细胞生长因子bFGF基因。经测序证明序列正确后接入到pEG(KT)中，转化到酵母表达菌株BCY123中。运用此系统表达了GST融合bFGF重组蛋白。经GlutathioneSepharose4B纯化后得到了较纯的可溶GST融合bFGF重组蛋白。此蛋白经thrombin酶切后，用SP-SepharoseA-25进行离子交换层析纯化。经SDS-PAGE电泳及WesternBlot检测证明得到纯度较高的bFGF重组蛋白。经血管内皮细胞MTT及自行构建的体外血管新生三维模型的检测，酵母表达的bFGF具有与商品化的bFGF具有相同的促内皮细胞增殖和促体外血管新生的活性。 第二部分 为了研究肝脏特异性表达基因FF456的功能，设计并合成了FF456特异性RNAi寡核苷酸片段，经退火后连接到RNAi质粒pSUPER中；同时从正常肝组织cDNA中克隆了FF456基因，经测序证明序列正确后接入到真核表达质粒pcDNA3.1中。质粒用脂质体转染正常肝细胞株L02，经G418筛选培养一星期后用有限稀释法挑选单克隆，RT-PCR检测证明L02pSUPER-7TR1和L02pSUPER-7TR2细胞株中FF456基因在mRNA水平表达有一定下调，L02pcDNA3.1-FF456细胞株中FF456基因在mRNA水平表达有明显上调。软琼脂集落形成，woundhealing，细胞黏附，流式细胞等检测结果显示：L02FF456RNAi细胞株比L02及L02pSUPER细胞株的增殖能力和迁移能力有较明显增强，而L02FF456过表达株与L02及L02pSUPER细胞株相比仅表现为非锚定生长能力增强。