SIRT1_PGC-1ɑ信号通路介导肢体缺血后处理减轻脑缺血再灌注损伤的研究

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目的:肢体缺血后处理已经成为了一种减轻脑缺血再灌注损伤、改善神经系统功能缺损的新的治疗策略,但其机制尚未完全明了,本实验主要探讨SIRT1_PGC-1α信号通路在肢体缺血后处理减轻脑缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法:健康雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组(sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、肢体缺血后处理组(LPostC组)、肢体缺血后处理+SIRT1抑制剂EX-527组(EX-527组),每组20只。其中I/R组、LPostC组、EX-527组采用石蜡线栓法建立大鼠缺血再灌注模型。LPostC组再灌注后立即夹闭双侧股动脉5min,开放5min三个循环制备肢体缺血后处理模型。EX-527组于术前48小时经侧脑室注射EX-527(1μg/μL,溶于25%DMSO)5μL,余处理同LPostC组。前三组组均予腹腔注射等剂量的25%DMSO做对照。再灌注24h后进行神经功能缺损评分;TTC染色检测大鼠脑梗死体积;TUNEL法检测神经细胞凋亡;分光光度计法测缺血脑组织SOD活性、MDA含量;Western blot检测SIRT1及PGC-1α蛋白的表达。结果:与sham组相比,I/R组出现神经功能缺损症状,SOD活性降低,MDA含量增加,SIRT1及PGC-1α蛋白表达减少(P<0.05)。与I/R组相比,LpostC组神经功能缺损症状明显改善,脑梗死体积缩小,神经细胞凋亡数量显著减少,SOD活性升高且MDA含量降低,SIRT1及PGC-1α蛋白表达明显增加(P<0.05)。与LPostC组相比,EX-527组神经功能缺损症状明显加重,脑梗死体积扩大,神经细胞凋亡数量增多,SOD活性降低,MDA含量升高,SIRT1及PGC-1α蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论:肢体缺血后处理对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与激活SIRT1_PGC-1α信号通路从而增强其抗氧化应激能力有关。
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