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第一部分抑制EZH2表达对阿霉素诱导的胃癌细胞衰老的影响及相关机制目的：检测阿霉素对胃癌细胞系的衰老诱导作用,及抑制EZH2表达对该作用的影响,并探讨相关机制。方法：使用阿霉素诱导AGS和MKN28两种胃癌细胞系衰老,采用SA-β-gal染色、：DAPI染色、流式周期检测方法检测衰老诱导效果。观察siRNA或特异性EZH2抑制剂EGCG联合阿霉素的作用对胃癌细胞的影响。使用Western-blot检测p53/p21通路活化程度。结果：阿霉素能够有效诱导AGS和MKN28两种胃癌细胞系衰老,从而抑制胃癌细胞增殖。沉默EZH2能够促进阿霉素对细胞的增殖抑制作用,但就其机制而言,p53野生型与突变型细胞涉及的机制不同。对p53突变型胃癌细胞MKN28,抑制EZH2在诱导衰老及促进凋亡两方面均与阿霉素存在协同作用,但对于p53野生型胃癌细胞系AGS无此协同作用。结论：实验结果表明阿霉素能够促进胃癌细胞衰老。并揭示了EZH2与阿霉素联合使用对胃癌细胞衰老和凋亡进程的影响与细胞p53背景密切相关。第二部分抑制EZH2表达对胃癌细胞系的衰老诱导机制目的：研究抑制EZH2表达对胃癌细胞系MKN28、SGC-7901中INK4/ARF位点的影响,从而探索衰老诱导机制。方法：采用MTT、细胞增殖实验及克隆形成实验检测shRNA-EZH2通过抑制EZH2表达对胃癌细胞增殖的影响。SA-β-gal染色、流式周期检测方法检测细胞衰老情况。通过Western blot及ChIP验证抑制EZH2表达对胃癌细胞系MKN28、SGC-7901中INK4/ARF位点的影响,从而探索衰老诱导机制。结果：shRNA-EZH2能够有效抑制EZH2及其下游产物H3K27me3的表达,并能抑制对胃癌细胞的增殖及克隆形成能力。对于p21、p16均不表达的MKN28细胞系,抑制p15表达能够阻碍shRNA-EZH2的衰老诱导作用。最后,通过Western blot及ChIP验证EZH2可通过表观遗传学途径影响INK4/ARF位点的转录,从而调控周期影响衰老。结论：揭示了EZH2在调控INK4/ARF位点表达及诱导胃癌细胞衰老中的重要作用,为以原癌基因EZH2为靶点的肿瘤治疗策略的应用奠定了一定理论基础。