影响大黄蒽醌类成分稳定性因素的研究

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目的:中药及中药制剂的疗效有自身的物质基础——有效成分,其含量如发生变化就会导致药物疗效的改变或丧失。就中药制剂制备过程来说,有许多外在因素都可造成中药制剂有效成分的量变甚至质变而影响到中药制剂最终的疗效。对可能的影响因素的研究与开发,对促成中药及其制剂发挥最佳疗效大有裨益,特别是对大黄的提取工艺、大黄的液体制剂及固体制剂的稳定性方面提供参考。 本研究所涉及的大黄为一常用中药材,其临床应用非常广泛,本论文主要对提取、浓缩干燥及贮存过程中的湿、热、空气、pH值、溶媒等因素进行了研究。 方法:1)芦荟大黄素、大黄酸,大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量测定方法采用HPLC法,色谱柱:EMerck Li Chrospher 100RP-18(250mm×4mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%高氯酸(85:15),流速0.8mL/min,柱温40℃,检测波长为254nm。方法稳定,灵敏;2)选定不同提取时间,以水,无水乙醇为溶媒提取,另考察一组在隔氧状态下水为溶媒提取,以这些提取液为对象分别测得各游离蒽醌的量及水解后游离蒽醌的量,从而间接测得提取液中结合蒽醌含量,揭示提取溶媒对其含量的影响、提取时间对其含量的影响及氧气对它们的影响;3)在70℃恒温下,利用HPLC法测定大黄五种蒽醌及其苷在水,70%乙醇及无水乙醇中随时间延长其量的变化情况,同时比较各组间的差异,了解不同溶媒对它们的影响;4)在70℃恒温下,利用HPLC法测量大黄五种蒽醌及其苷在不加酸碱与pH值为1.0及13.0环境中随时间的量的变化,比较各组之间的差异;5)在70℃恒温下,利用HPLC法测定大黄五种蒽醌及其苷的量在普通烘箱与真空烘箱中随时间的变化,比较两者之间的差异,揭示空气对其的影响情况。 结果:1)芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚与其它组分峰的分离度良好,芦荟大黄素线性回归方程为:Y=-2410+5374661X,r=0.9994,在0.016~0.160μg呈良好线性关系,其平均回收率为104.8%,RSD=1.65%;大黄酸线性回归方程为Y=2148+5440831X,r=0.9997,在0.012~0.120μg呈良好线性关系,其平均回收率为104.0%,RSD=2.71%;大黄素线性回归方程为Y=1653+4923143X,r=0.9998,在0.017~0.166μg呈良好线性关系,其平均回收率为101.4%,RSD=1.86%;大黄酚线性回归方程为Y=5823+6496978X, — — *0.9998,在 0*29-0.286 P g呈良好线性关系,其平均回收率为 103.2%, RSD叫.93%;大黄素甲醚线性回归方程为Y=3827+3385073X,,0.9996;在 0刀08-0刀79 u g呈良好线性关系,其平均回收率为 102刀%,RSD-1.85%. 二)水提大黄液中,大黄各游离葱醒含量以回流 10分钟为最高,而结合g@ 先随回流时问延长而增加,至回流40-60分钟时煎出的结合葱酿量最高,后随回 流时腆长而减少;无水乙醇回流 10分钟,结合葱醒含量最高,回流 40-60分 钟游离葱酿总量最高;隔氧提游离葱酿及结合葱醒含量随不同回流时间其含量改 变不大.无水乙醇不同回流时间提取的游离恿醒及结合葱醒均较相应回流时问的 水提组及隔氧水提组高,隔氧水提组与水提组相比较,隔氧水提组游离及结合葱 酿均高于水提组,其中尤以游离葱醒总量差异较大. 3)以水、70%乙醇及无水乙醇为溶媒,游离恿醒及结合葱醒的量随时问延 长大致呈一种下降的趋势,比较三组溶媒中葱醒含量,以无水乙醇组较高,70% 乙醇次之,水为溶媒最低。 。4)未加酸碱组与加碱组游离葱酿及结合葱醒量呈下降趋势;而加酸组游离 葱醒含量先随时间处长而增加,至10小时为最高,但结合葱醒量随时间延长而 显著减少;加碱组不同时间游离恿醒量较未加酸碱组相应游离葱醒量少,而结 合葱醒量较未加酸碱组高;比较三组不同贮存时间的总葱醒含量,其中碱性环境 中下降较另两组多,而酸性条件与不加酸碱组相差不大. 5)真空或非真空干燥均随受热时问增加游离葱醒及结合葱醒量减少,只是真 空组相对来说差别较小,结合葱醒总量以真空干燥组为高. 结论:本实验以大黄为研究对象,建立了其。种葱酿及其普的含量测定方法, 考察了不同因素对这五种恿酿及其普的影响,研究表明:热对葱酿类成分有破坏 作用,而这种作用在有水的情况下更甚;空气(氧气)的存在也令麓醒含量下降; 葱酿类成分在有机溶媒中较稳定;pn值为酸性时,游离葱醒随时问有一上升段, 但总葱酿含量与相应不加酸碱的含量相差不大,故可认为破坏作用不大,而pH 值为碱性时,有破坏作用较大.
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