北美车前草化学成分及毛蕊花糖苷的富集工艺研究

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目的:系统研究北美车前草中化学成分及毛蕊花糖苷的富集工艺,并评估其体外抗氧化能力。方法:取干燥的北美车前草全草经乙醇水溶液回流提取,提取物先后经石油醚、乙酸乙酯萃取。其萃取物分别采用柱色谱、半制备液相等分离方法分离化合物。结合各化合物理化性质,运用波谱技术并参考相关文献鉴定化合物结构。采用高效液相色谱和紫外分光光度法对北美车前草化学成分进行含量测定。通过正交试验确定北美车前草中毛蕊花糖苷的最优提取方案,并通过大孔树脂色谱确定毛蕊花糖苷的最优富集工艺。通过研究北美车前草不同萃取部位及毛蕊花糖苷粗品的DPPH自由基和超氧阴离子自由基清除能力,对其抗氧化能力进行评估。结果:从北美车前草乙醇提取物中共分离鉴定出6个化合物,分别是豆甾醇(1)、β-谷甾醇(2)、熊果酸(3)、齐墩果酸(4)、大车前苷(5)、京尼平苷酸(6)。测得3个时期北美车前草大车前苷的含量是0.53-0.64 mg/g,毛蕊花糖苷的含量是34.76-36.88 mg/g,异毛蕊花糖苷的含量是3.27-3.82 mg/g,齐墩果酸的含量是0.25-0.45 mg/g,熊果酸的含量是1.31-1.79 mg/g以及总黄酮的含量是44.53-53.48 mg/g。北美车前草中毛蕊花糖苷的最佳提取工艺是:80%的乙醇,料液比15 mL/g,回流时间2 h,提取两次。北美车前草中毛蕊花糖苷的最佳富集工艺是:正丁醇萃取物经X-5大孔树脂柱,首先采用超纯水和10%的乙醇洗脱除杂,再用50%的乙醇洗脱,流速为2 BV/h,洗脱液体积6 BV。相同浓度的各部位,对DPPH自由基的清除能力、对超氧阴离子自由基清除能力,毛蕊花糖苷粗品>正丁醇部位>乙酸乙酯部位>石油醚部位。结论:从北美车前草乙醇提取物中共分离鉴定出6个化合物。北美车前草中毛蕊花糖苷,异毛蕊花糖苷,总黄酮含量均较高,高于文献中报道的中药车前草中的含量。实验确定了毛蕊花糖苷的最佳富集工艺。DPPH自由基及超氧阴离子自由基清除实验显示北美车前草具有一定的体外抗氧化能力,为北美车前草的开发利用提供了理论依据。
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