【摘 要】
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目的通过给予药物诱发性大鼠肝癌模型腹腔注射ICG-001,以检测大鼠肝脏肿瘤β-catenin信号通路、以及相关周期及凋亡因子的变化,为进一步探讨β-catenin信号通路与肝癌之间的
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目的通过给予药物诱发性大鼠肝癌模型腹腔注射ICG-001,以检测大鼠肝脏肿瘤β-catenin信号通路、以及相关周期及凋亡因子的变化,为进一步探讨β-catenin信号通路与肝癌之间的关系提供实验依据,同时也为肝癌的靶向治疗提供实验依据。方法适应环境7d后,大鼠饲以含N-亚硝基二乙胺(DEN)(76ppm)饮水,连续6周后改为自由饮水3周,后继续饲以含DEN(76ppm)饮水,第16周时存活40只,随机分两组,分为ICG-001组(ICG-001在DMSO中溶解)和DMSO组,每组20只,ICG-001组按10mg/kg/d腹腔注射ICG-001,DMSO组注射相应体重剂量的DMSO,时间为10天。所有大鼠经解剖取肝脏标本后,行常规石蜡包埋,切片,HE染色,光学显微镜下观察两组大鼠肝脏组织变化情况;两组大鼠肝脏标本均行Western blotting和Quantitative Real-time Pcr方法,检测β-catenin,cyclinD1,Bcl-2的蛋白及mRNA表达情况,将检测结果使用相关软件转化为数据,使用SPSS18.0软件包统计分析结果。结果给予ICG-001 10天后,ICG-001组:死亡3只,未成瘤4只;DMSO组:死亡4只,未成瘤2只。HE结果显示:ICG-001组:13只经病理证实为肝癌;DMSO组:14只经病理证实为肝癌。Western blotting结果显示ICG-001组中β-catenin,cyclinD1,Bcl-2的蛋白表达较DMSO组表达明显减少,使用Image J软件测量条带的灰度值,将其转化为数据经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义。Quantitative Real-time Pcr结果显示,ICG-001组中β-catenin,cyclinD1,Bcl-2的mRNA表达较DMSO组表达明显减少,数据处理后经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义。结论N-亚硝基二乙胺(DEN)可诱发大鼠肝癌模型;ICG-001能阻断SD大鼠肝癌模型Wnt/β-catenin信号通路,使大鼠肝癌模型中肿瘤的β-catenin,cyclinD1,Bcl-2的蛋白及mRNA表达减少,有可能是潜在治疗肝肿瘤的新方法。
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