本论文由综述、研究报告两部分组成。第一部分包括免疫分析的历史、电化学发光免疫分析的原理和特点、电化学发光免疫分析标记技术、电化学发光免疫分析的主要类型、近几年电化学发光在免疫分析中的应用及其电化学发光免疫分析新方法六部分。第二部分主要研究了鲁米诺和光泽精电化学发光体系，建立了基于电子转移偶合电化学发光法测定盐酸普鲁卡因、吲哚醌、维生素B2的方法；利用免疫反应前后分子扩散系数的变化和免疫竞争法，建立了多标记均相电化学发光免疫分析法，以地高辛、鲁米诺和BSA为模型，建立了测定抗地高辛抗体和地高辛含量的电化学发光免疫分析法。 电化学发光是对电极施加一定的电压进行电化学反应，反应的产物之间、或反应的产物与体系中的某种组分发生化学反应，用光电倍增管等普通光学手段测量发光光谱和强度从而对物质进行痕量分析的一种方法。电化学发光以其分析方法简便、灵敏度高、选择性好、具有可控性等优点受到人们的广泛关注。八十年代以来，电化学发光被应用到实际当中，开始了免疫电化学发光和生物发光的研究。进入九十年代，成品的仪器和电极材料的改进，更加拓宽了电化学发光分析的应用领域。电化学发光与各种技术如高效液相色谱、毛细管电泳、磁性微粒等得到了广泛结合。目前，电化学发光研究者正致力于电化学发光新体系的研究、电化学发光生物芯片的研制、电化学发光免疫的继续完善、电化学发光与其他技术的进一步结合等方面的研究。本论文的综述部分对免疫分析的历史、电化学发光免疫分析的原理和特点、电化学发光免疫分析标记技术、电化学发光免疫分析的主要类型、电化学发光免疫在分析中的应用及其电化学发光免疫分析新方法进行了评述。主要介绍了近几年电化学发光在免疫分析中的应用，对不同的电化学发光体系-鲁米诺体系、钌联吡啶体系、吖啶酯体系等在免疫分析中的应用进行了总结。 研究报告由四部分组成。前三个研究报告主要是建立基于电子转移偶合电化学发光分析法。利用已有的鲁米诺和光泽精电化学发光体系，对盐酸普鲁卡因、吲哚醌、维生素B2进行测定。基于盐酸普鲁卡因对鲁米诺电化学发光的增强作用，建立了鲁米诺电化学发光法测定盐酸普鲁卡因的新方法。在优化的实验条件下，盐酸普鲁卡因在4.0×10-7g／mL～6.0×10-6g／mL有良好的线性关系，线性方程为ΔI=303.7C-23.7(C单位为10-6g／mL)，相关系数为0.9984。根据IUPAC规定，检测限为2.0×10-7g／mL(S／N=3)。对1.0×10-6g／mL的普鲁卡因进行11次测量，相对标准偏差为4．4O。可用于针剂样品的测定。 利用光泽精体系的电化学发光，建主了电子转移偶合电化学发光法测定叫咪醒和维生素 BZ的方法。咆咪酿对恒电位－0石SV下光泽精的电化学发光有强烈的增强作用，基于此建立测足喇噙酸的分析万法。在 4．SX10”飞／。L＊．9X10－’g／mL的范围内咧咪醒的浓度与相对电化学发光值有良好的线性关系，吁！咪醒的检测限为3．3 XIO－‘g／iL，对 IXIO飞／mL的叫咪醒进行 11次平行测定，方法的相对标准偏差为 3．8O。维生素 BZ对恒电位｛．65V下光泽精的电｛匕学发先也有强烈的增强作用，基于此，对维生素 BZ进行了定量测定。在优化的实验条件下，发现在 2．IX10”、／mL－3刀 XIO－飞／mL维生素 BZ与发先强度之间有良好的线性关系，线性方程为nl－187＋112C （单位为 10｛g／mL，r为 0．9968）。根据IUMC的规定，当Sp3时，维生素 B。的检测限为 8．2 xlo一、／mL，该方法相对标准偏差为 4刀％（n司，C＝8刀xlo”sg／mL）。可用于针剂和片剂中的维生素B。含量的测定。以上三部分实验的优点在于：1基于电子转移偶合电化学发光分折法建立测定药物的新方法；2在中性水相溶液中研究电化学发光体系，介质条件缓和。 第四部分是利用鲁米诺体系的电化学发光法，探索多标记均相电化学发光免疫分析法的可行性。以地高辛、鲁米诺和BSA为模型，建立测定抗地高辛抗体和地高辛含量的均相电化学发光免疫分析新方法。用鲁米诺和地高辛标i己 BSA，一个挑A上可以标记多个鲁米诺和地高辛，提高了发光效率，也可以降低检测限。利用免疫反应前后分子扩散系数变化对抗地高辛抗体和地高辛进行测定。在选定的实验条件下，当标记复合物的浓度为 5．0 xlo一、／mL（地高辛的浓度），抗体在稀释300—50000倍问变化时，电化学发光信号均呈降低趋势。固定标j己地高辛抗原浓度为 5．0 XIO一、／mL，抗地高辛抗体的溶液的稀释 5000倍时，地高辛浓度与电寸匕学发先强度在 0．sng／mL—30ng／mL间有线性关系，方法检测限为 2．8 x10”’‘g／mL。对 l．0 xlo“’卵L的地高辛进行口 次测定，相对标准偏差为 5．l0。对血清样品中地高辛含量进行测定，试验结果表明，本文提出的多标记均相电化学发光免疫分析方法是可行的。本部分实验的设计有如下优点：l提出了多标i己均相电化学发光免疫分析法；2在小分子间引入大分子，可以在一个大分子上标记若干个小分子，提高了标j己率，同时也提高了方法的灵敏度；3 小分子与大蛋