肿瘤疫苗现已成为一种理想的肿瘤治疗方法,依据肿瘤细胞表面过量表达的结构——肿瘤相关糖抗原(TACAs),设计并合成抗肿瘤疫苗,用来刺激人体的免疫系统,产生免疫应答,目的是为了使肿瘤的生长、繁殖和扩散受到抑制,最终杀死肿瘤。Thomsen-Friedenreich(TF)抗原是非常重要的肿瘤靶点之一,它在结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、肝脏和胃癌中都存在过量表达。然而TF抗原不能激起可产生高亲和力的IgG抗体的细胞免疫。因此,我们需要将其与含有T细胞表位的载体蛋白偶联,激起机体的细胞免疫,产生有效的IgG抗体水平。由于天然的TF抗原容易被内源性糖苷酶降解,从而导致疫苗糖抗原完整性被破坏,降低特异性免疫反应能力。近年来MUC1相关肿瘤疫苗研究显示,氟原子的引入不仅会增强TF抗原的免疫原性,同时可以有效改善其代谢稳定性和生物利用度。本文以氨基半乳糖盐酸盐与半乳糖为起始原料,运用化学法合成天然及氟代TF抗原二糖砌块。首先分别经六步与两步反应,以31%与79%的收率得到氟代与天然单糖供体;再经三步反应以28%的收率得到单糖受体;最后经五步反应分别以42%和45%的收率得到氟代与天然二糖砌块。接着利用固相合成法合成链状十肽,再经过三步反应以77%的收率得到环肽骨架。然后使用Click法将二糖与环肽结构连接以设计成多价糖簇,经两步反应分别41%与35%的收率得到氟代与天然糖肽,再与载体蛋白通过方酸二乙酯连接,合成四价糖肽肿瘤疫苗。本课题创新点在于使用环肽设计多价结构,即通过将糖抗原与环十肽中四个赖氨酸残基侧链偶联来合成四价糖簇结构,旨在增强抗原呈递过程中的免疫应答,从而提高疫苗的免疫原性。本课题对所合成的多价糖肽疫苗进行了小鼠免疫实验,对实验取得的血清进行抗体滴度测定,结果显示两种疫苗都产生了一定水平的IgG抗体,天然与氟代疫苗产生的抗体滴度分别是1269与6646,说明我们设计的疫苗成功使小鼠产生免疫应答,,并且氟代修饰的糖肽疫苗的IgG抗体滴度水平高于天然疫苗;同时当以天然糖抗原作为包被抗原时,氟代疫苗的抗体滴度(3802)高于天然疫苗的抗体滴度(1269),说明氟代疫苗产生的抗体可以特异性交叉识别天然TF糖抗原,显示出的氟代糖肽疫苗作为肿瘤疫苗的潜在开发价值。