蒜类产品中的功能性成分及抗肝癌活性研究

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大蒜为百合科葱属植物(Allium Sativum L)蒜的鳞茎,应用历史悠久。它营养丰富,具有多种药理作用,因此不仅是一种风味调料,而且作为一种功能食品在预防和治疗多种疾病方面发挥重要的作用。因加工方式的不同,大蒜制备成多种蒜类产品后其成分和活性也随之变化。主要研究内容如下:  (1)以普通白蒜(WG)为原材料,通过不同的加工方式得到三种蒜类产品包括绿蒜(GG)、腊八蒜(LAG)、黑蒜(BG),研究比较了这四种蒜类产品在功能性成分和活性上的差异。采用比色法测定四种蒜产品粗提物中多糖、多酚、黄酮及含硫化合物的含量;气质联用(GC-MS)技术分析含硫化合物的成分组成。比较四种蒜类产品的抗氧化活性和对三种癌细胞的增殖抑制作用。结果表明:黑蒜多酚含量高、抗氧化活性好,WG、GG、BG及LAG对DPPH自由基的半数清除率(IC50)分别为0.94 mg/mL、0.89 mg/mL、0.67 mg/mL和0.88 mg/mL。绿蒜中含有最多的含硫化合物, GC-MS测定其相对含量:C4H8S3为6.58%,C6H10S3 为4.03%,C6H10S4为2.52%,C6H8S2为4.03%。并且相较其他三种蒜类产品具有更好的抗肝癌细胞 SMMC7721 生长的作用( IC50:74.62 μg/mL)。  (2)采用GC-MS法对绿蒜不同极性萃取物正己烷层(n-Hex)、乙酸乙酯层(EA)和正丁醇层(n-Bu)进行成分分析,比较其抗氧化活性及抗癌活性。结果表明,正己烷层分析得到八种含硫化合物,对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用最强(IC50:32.36μg/mL)。进一步研究绿蒜正己烷萃取物(GGHE)对H22荷瘤小鼠的体内抗肿瘤活性,结果证明它能有效抑制荷瘤小鼠肿瘤生长(L-GGHE的抑制率为71.48%),提高其胸腺指数和脾脏指数,改善小鼠健康状况;除此之外,GGHE能提高荷瘤小鼠肝脏的CAT、SOD、GSH-Px活力,还能升高小鼠血清中的细胞因子IL-2和TNF-α的水平,降低血管内皮生长因子VEGF和MDA的水平,通过直接或间接作用调节免疫功能、提高抗氧化活性来发挥抗肿瘤活性。  (3)采用溶剂萃取、大孔树脂、制备液相等技术对绿蒜色素成分进行了分离,探究了分离得到的色素对肝癌HepG2的生长抑制作用并进行了绿蒜蓝色素(BP)和绿蒜黄色素(YP)的体内动物实验;分离得到的两种色素成分分别鉴定为蓝色素BP-1和黄色素YP-3,根据质谱推测BP-1可能为C19H17N4O2S,YP-3可能为C16H11N2O6S。BP-1对HepG2细胞抑制作用更强(IC50:32.36μg/mL);BP与YP相比能更好的抑制H22荷瘤小鼠的肿瘤生长(p<0.05)。  以上实验表明,绿蒜相比白蒜具有更丰富的含硫化合物,对肝癌细胞SMMC-7721和HepG-2具有更好的抑制作用,同时很好地抑制H22荷瘤小鼠的肿瘤生长。本研究为绿蒜作为抗肝癌功能食品的研发提供理论依据。
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