【摘 要】
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猪细小病毒2型(Porcine parvovirus type2，PPV2)是近年来新发现的细小病毒科成员，与传统猪细小病毒的亲缘性很远，除在缅甸和中国浙江检测及序列分析了4株病毒外，尚未见其他地区有
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猪细小病毒2型(Porcine parvovirus type2，PPV2)是近年来新发现的细小病毒科成员，与传统猪细小病毒的亲缘性很远，除在缅甸和中国浙江检测及序列分析了4株病毒外，尚未见其他地区有检测报告。鹅圆环病毒(Goose Circovirus，GoCV)也是近年来发现的圆环病毒科圆环病毒属成员，能引起鹅免疫抑制，从而继发感染其他病原。为检测和控制PPV2和GoCV，本研究选取编码结构蛋白的PPV2 ORF2和GoCV cap基因片段，应用重组腺病毒系统进行了表达。
将PPV2 ORF2和GoCV cap基因首先插入到穿梭载体pShuttle-CMV中获得重组穿梭质粒pShuttle-PPV2-ORF2和pShuttle-GoCV-Cap；PmeⅠ酶切线性化的重组穿梭质粒电转化至含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态中进行同源重组，经卡那抗性筛选和酶切鉴定，获得重组腺病毒质粒pAd-PPV2-ORF2和pad-GoCV-Cap；最后将PacⅠ酶切线性化的重组腺病毒质粒与脂质体Lipofectamine TM2000混合，转染HEK-293细胞获得重组腺病毒；经蚀斑纯化和鉴定，将重组腺病毒命名为rAd-PPV2-ORF2和rAd-GoCV-Cap。
应用间接免疫荧光方法检测到PPV2 ORF2和GoCV cap基因在重组腺病毒感染的HEK-293细胞中表达，并证实重组腺病毒系统表达的PPV2 ORF2和GoCV cap基因产物具有良好的免疫反应原性，为PPV2和GoCV血清抗体间接免疫荧光检测方法的建立，以及衣壳蛋白免疫原性和基因工程疫苗的研究奠定基础。
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