散结镇痛胶囊是由三七、龙血竭、浙贝母和薏苡仁四味药材组成的成方制剂,具有软坚散结、化瘀定痛之功效,临床用于治疗子宫内膜异位症(EMs)及其所致的继发性痛经、月经不调等病症。该产品于2004年获新药证书,通过近十年的市场推广,因其确切的临床疗效,成为中药治疗子宫内膜异位症的特色大品种之一。但由于散结镇痛胶囊所含成分相对复杂,药效物质基础尚未明确,一定程度上限制了该品种的学术推广。本课题主要对散结镇痛胶囊的化学成分、入血成分以及相关入血成分的药理活性进行了研究。重点拟通过散结镇痛胶囊体内外化学成分的研究,为后续散结镇痛胶囊治疗子宫内膜异位症的药效物质基础研究奠定基础,并且为散结镇痛胶囊的质量标准提升提供技术支持,以提高产品质量及临床疗效的稳定性。研究主要分为两个部分:第一部分:散结镇痛胶囊化学成分研究。利用液相色谱-单重四级杆-飞行时间质谱联用(UPLC/Q-TOF-MS)技术对散结镇痛胶囊化学成分进行了分析研究,检测到胶囊内容物中45种化学成分,结合化合物紫外光谱(UV)信息、一级质谱信息(ESI-MS)、二级质谱信息(ESI-MSMS),对散结镇痛胶囊中的各类成分在质谱中的裂解模式进行了系统的阐述,分析鉴定了 38个化学成分,其中13个成分经过标准品比对鉴定,明确了化合物结构。在对胶囊内容物化学成分分析的基础上,研究初步建立了散结镇痛胶囊的两张HPLC-UV指纹图谱,用于控制散结镇痛胶囊制剂的稳定性和质量均一性。第二部分:散结镇痛胶囊的入血成分研究。采用了血清药物化学实验方法对散结镇痛胶囊入血成分进行研究。实验中以正常大鼠为实验动物,灌胃散结镇痛胶囊后制备含药血浆,采用UPLC/Q-TOF-MS技术分析比较散结镇痛胶囊、大鼠灌胃散结镇痛胶囊后的含药血浆和空白血浆中成分差异,检测到入血成分20个,根据各峰的保留时间和UV光谱图,一级质谱和二级质谱图,分析鉴定了 16个原型成分和1个可能的代谢成分,另外还有3个未知成分,结合散结镇痛胶囊复方及处方中各单味药材的化学成分分析结果,初步判定了入血成分的来源药材和归属。此外在上述的研究基础上,采用取自子宫内膜异位症(EMs)大鼠的异位内膜间质细胞建立药理实验模型,研究了 8个入血成分(人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、三七皂苷R1、7,4’-二羟基黄酮、龙血素B、贝母素甲、贝母素乙)对EMs大鼠子宫异位内膜间质细胞的影响,研究结果表明,人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、7,4’-二羟基黄酮、龙血素B、贝母素甲、贝母素乙均能抑制子宫内膜细胞生长;同时贝母素乙也可以抑制6-keto-PGF1α、TXB2分泌,升高K/T比值,可以缓解子宫平滑肌的痉挛,减轻因子宫内膜异位所致的痛经症状。研究结果进一步提示,入血成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、三七皂苷R1、7,4’-二羟基黄酮、龙血素B、贝母素甲、贝母素乙,与散结镇痛胶囊的药效作用存在一定的相关性,为进一步明确散结镇痛胶囊的药效物质研究奠定了基础及提供数据支持。