饲料中黄曲霉毒素B1监测及其对蛋鸡肝脏脂类代谢和抗氧化功能的影响

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuxiaorou12345
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课题调研了我国饲料原料中黄曲霉毒素B1及玉米中各种霉菌毒素的污染情况,并研究了黄曲霉毒素B1对蛋鸡肝脏脂类代谢和抗氧化功能等方面的影响,探讨其影响途径与机制,对生产提供一定的指导意义。从全国各省市采集84份饲料原料,利用ELISA原理,检测其中AFB1的含量。结果发现,饲料原料中AFB1的检出率高达96.4%,但超标率为0;饲料样品中AFB1含量≤20μg/kg的比例为97.62%。以上结果表明,我国饲料普遍受到AFB1的污染,但并非所检测饲料原料的主要问题;可以考虑把国标规定的饲料原料中AFB1的允许限量50μg/kg及30μg/kg改为20μg/kg,使饲料原料和产品的限量标准尽可能一致,以利于国家的监管及饲料企业组织生产。从全国各省市具有代表性的饲料企业中,采集36份玉米饲料,利用ELISA原理,检测其中的AFB1、ZEN、DON、OTA及FB1的含量。结果表明,DON、ZEN、AFB1和FB1的检出率分别为100%、97.14%、91.67和88.89%,OTA检出率为0;FB1和OTA没有超标,DON、FB1和ZEN的超标率分别33.33%、30.56%和14.29%,污染比较严重;ZEN和DON、AFB1和FB1的相关系数分别为0.512和0.489,两者均有显著的相关关系。分离并培养3日龄雌性海兰褐雏鸡肝细胞,培养48h后开始正式试验。试验组为含0.05μg/mL AFB1的基础培养液,处理24h。结果表明,AFB1处理显著增加了细胞上清液中GPT、GOT以及LDH的活性;显著降低了肝细胞脂肪代谢相关基因FAS、ACC、ME、LXR、ApoB100、MTP及L-CPT1mRNA的表达,对SREBP-1c mRNA的表达无影响;显著降低了肝细胞中Mn-SOD、Cu-Zn-SOD、GPX-Px和CAT mRNA的表达;显著增加了MDA的含量,对8-OHdG和蛋白质羰基的含量无显著影响;对内质网应激相关基因GRP78及GRP94mRNA的表达及GRP78蛋白水平的表达无显著影响。以上结果揭示AFB1使肝细胞受到一定程度的损伤,是通过LXRα信号通路而可能没有通过SREBP-1c信号通路来降低肝细胞脂肪从头合成的,并降低抗氧化功能及导致脂质过氧化损伤。分离并培养3日龄雌性海兰褐雏鸡肝细胞,培养48h后开始正式试验,分为4个处理,分别为对照、AFB1(0.5μg/mL)、ZEN(10μg/mL)及AFB1加ZEN,处理24h。结果表明,AFB1和ZEN对肝细胞脂类从头合成相关基因FAS和ACC、脂类运输相关基因apoB100、脂类调控因子LXR及抗氧化物酶Mn-SOD和Cu-Zn-SOD mRNA的表达存在着一定的颉颃效应,但对抗氧化物酶GPH-Px mRNA表达存在着一定的亚加性效应。选取69周龄产蛋率和体重相近的健康蛋鸡16羽,标准笼养,随机等分为2组,试验组按55μg/kg体重的剂量每日14:00静脉注射AFB1,对照组注射同剂量的DMSO,自由采食和饮水,连续注射7d后,分别于空腹状态下在8:00取样。结果表明,注射AFB1后,平均产蛋率显著下降,体增重、平均采食量及肝脏发育指数无变化;血清中TG的含量显著下降(P<0.01);肝脏中L-CPT1mRNA的表达显著升高(P<0.05),FAS、ACC、ME、SREBP-1c、LXR、MTP、ApoB100及VLDL-ⅡmRNA的表达无显著差异,肝脏中T-SOD、CAT和GSH-PX的活性及氧化损伤产物蛋白质羰基、丙二醛和8-OHdG的含量均无差异。以上结果揭示,黄曲霉毒素B1对肝脏脂类的从头合成没有影响,可能是通过降低脂类的运输、增加脂肪酸的氧化及氧化损伤来降低血浆甘油三酯水平的。
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