【摘 要】
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本文针对有机磷农药残留快速检测技术存在的问题,主要进行了以下三个方面的研究:1、比较了三种来源(家蝇、鲤鱼脑、鸡肝)的乙酰胆碱酯酶(AChE)对三种有机磷农药(敌敌畏、敌百虫、
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本文针对有机磷农药残留快速检测技术存在的问题,主要进行了以下三个方面的研究:1、比较了三种来源(家蝇、鲤鱼脑、鸡肝)的乙酰胆碱酯酶(AChE)对三种有机磷农药(敌敌畏、敌百虫、氧乐果)的敏感性。发现,对于敌敌畏,家蝇>鲤鱼脑>鸡肝;对于敌百虫,家蝇敏感性最高,鲤鱼脑和鸡肝酶对其不敏感;对于氧乐果,在0~300μg·L-1浓度时,对三种酶的抑制率相差不大,当浓度大于300μg·L-1时,家蝇酶的抑制效果明显好于其余两种。综合考虑三种酶对三种农药的敏感性,确定家蝇的AChE是较为理想的指示有机磷类农药的敏感酶。2、研究了家蝇AChE在三种微孔滤膜(尼龙、醋酸纤维素和硝酸纤维素,孔径均为0.45μm)上的固定化效果,确定硝酸纤维素膜的固定效果较好。对硝酸纤维素膜固定家蝇AChE的最佳条件进行了研究,确定为:AChE用量为10U,5%(体积分数)的戊二醛5μL,30μL 1%(质量分数)的牛血清蛋白(BAS),配成200μL的酶溶液,4℃固定8h。并对最优条件下的固定化效果进行了评价。3、对商品化的AChE试剂包进行了优化研究。在保证较高灵敏度的前提下,确定了一种更经济的试剂配方,即酶和底物的用量调整为推荐用量的3/4,显色剂用量调整为推荐用量的1/2,总体上节约了1/3的成本。通过F检验证明,调整后配方和原配方之间无显著性差异。调整后的配方对三种常见有机磷农药氧乐果、敌百虫和敌敌畏的检出下限大约分别为0.37mg·L-1、0.09mg·L-1和0.035mg·L-1,检测限基本不变。
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