论文部分内容阅读
宫颈癌（cervical cancer）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,严重影响患者的身心健康,给患者家庭带来重大经济负担及心理压力。高危型人乳头瘤病毒（high risk human papilloma virus,hr-HPV）持续感染是宫颈癌发生及发展的重要原因。HPV感染主要发生于性活跃的女性,约80%女性50岁之前曾被HPV感染一次,90%的HPV感染可在两年内被清除,仅少部分存在持续感染。持续感染的hr-HPV会侵犯未分化的宫颈角质形成细胞,并且分化出逃避宿主免疫应答清除的分子机制。鉴于目前尚无特效药等可清除HPV感染,临床处理主要是对“病”而非对“因”治疗,即在发现宫颈病变时及时进行治疗,而并未对“因”上干预治疗。因此,如能明确hr-HPV感染导致宫颈病变的免疫逃逸相关因子,并早期发现宫颈病变,为阻断hr-HPV感染相关的宫颈癌前病变及宫颈癌发生、发展的研究提供理论依据。免疫逃逸是癌症发生发展至关重要的原因之一。肿瘤微环境中存在的肿瘤抑制性免疫细胞及因子,如调节性T（regulatory T,Treg）细胞、转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）等,可减弱机体免疫的功能,降低机体清除受损DNA及异常细胞的能力,导致受损DNA持续复制及异常细胞增殖,进而引起癌症的发生、发展。核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族3（NLR family pyrin domain containing 3 protein,NLRP3）是模式识别受体（pattern recognition receptors,PRRs）的一员,可识别病原相关分子模式（pathogen associated molecular patterns,PAMPs）及危险相关分子模式（damage associated molecular patterns,DAMPs）,促进炎性介质的产生与分泌,参与机体炎症反应及先天性免疫应答。中性粒细胞与淋巴细胞比值（neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR）及血小板与淋巴细胞比值（platelet-to-lymphocyte ratio,PLR）在免疫及炎症反应中发挥重要作用,一旦表达失衡,可能导致肿瘤的发生、发展。研究发现PLR、NLR与子宫内膜癌、卵巢癌、胃癌等多种实体恶性肿瘤的临床病理特征及预后相关。hr-HPV持续感染会导致宫颈病变甚至癌变,这可能与hr-HPV抑制机体的免疫应答有关。NLR、PLR及NLRP3在先天性免疫应答中发挥重要作用,但关于伴hr-HPV感染的宫颈病变与PLR、NLR、NLRP3的关系目前研究较少。本文应用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）检测NLRP3炎性小体在hr-HPV感染的慢性宫颈炎、宫颈病变及早期宫颈癌组织中的表达情况,检测并分析hr-HPV感染的宫颈病变及早期宫颈癌术前外周血中PLR、NLR的表达差异。分析NLRP3、PLR、NLR表达水平与早期宫颈癌临床病理因素的关系,旨在探讨免疫及炎症相关因子PLR、NLR、NLRP3在hr-HPV感染的宫颈病变中作用。回顾性分析2019年1月至2020年8月于秦皇岛市第一医院行手术治疗或宫颈组织活检的139例患者的临床病理资料,其中包括可手术治疗的早期宫颈癌46例（IA1-IB2、IIA1）、子宫颈高级别鳞状上皮内病变（high-grade squanmous intraepithelial leision,HSIL）32例、子宫颈低级别鳞状上皮内病变（low-grade squamous intraepithlial leision,LSIL）30例及慢性宫颈炎31例,病例均于我院检验科行子宫颈脱落细胞HPV DNA分型检测且合并至少一种hr-HPV分型阳性。通过IHC检测NLRP3在上述各组标本中的表达情况,分析NLRP3在伴有hr-HPV感染宫颈病变及早期宫颈癌中的表达及其与早期宫颈癌临床病理因素的关系。此外,收集上述所有患者术前或活检前1周内的外周血中性粒细胞、血小板及淋巴细胞的计数,并计算PLR、NLR,分析PLR、NLR在各宫颈病变术前外周血中的表达情况,通过ROC曲线分别确定PLR、NLR界定慢性宫颈炎、宫颈癌的临界值,并讨论PLR、NLR水平与宫颈癌临床病理因素之间的关系。IHC结果显示,NLRP3主要于细胞质中表达,NLRP3的表达水平随着宫颈病变程度的加重而逐渐下降。NLRP3在宫颈炎组织、LSIL组织、HSIL组织及早期宫颈癌中的阳性表达率分别为45.16%（14/31）、40.00%（12/30）、28.13%（9/32）及13.04%（6/46）。NLRP3在早期宫颈癌组表达水平低于宫颈炎组及LSIL组,差异具有统计学意义（P<0.05）,而在其他组间比较无统计学意义（P>0.05）。NLRP3在早期宫颈癌组中的表达情况与临床病理因素的关系:NLRP3在病灶≤2cm中表达水平明显高于>2cm者,差异具有统计学意义（p<0.05）。而NLRP3表达水平与早期宫颈癌的病理分期、是否为HPV16/18感染、病理分化程度、脉管浸润、病理类型、宫颈间质浸润深度无关（P>0.05）。PLR、NLR在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL、早期宫颈癌外周血中的表达水平均逐渐升高。PLR在HSIL组、早期宫颈癌组外周血中高于慢性宫颈炎组、LSIL组,差异均具有统计学意义（P<0.05）,NLR在宫颈癌外周血中水平高于慢性宫颈炎组且差异有统计学意义（P<0.05）,HSIL组与宫颈炎组比较差异有统计学意义（P<0.05）。NLR、PLR在其他组间比较无统计学意义（P>0.05）。根据ROC曲线,取133作为PLR界定宫颈癌与慢性宫颈炎的最佳截点;取1.57作为NLR界定宫颈癌与慢性宫颈炎的最佳截点。根据PLR、NLR的取值,宫颈癌病例分为PLR≥133组和PLR<133组;NLR≥1.57组和NLR<1.57组。术前PLR≥133组和PLR<133组各临床病理因素比较差异均无统计学意义（P>0.05）。术前NLR≥1.57组和NLR<1.57组的早期宫颈癌病理分化程度比较差异有统计学意义（P<0.05）,其他各临床病理因素比较差异均无统计学意义（P>0.05）。Spearman相关性分析显示宫颈癌中PLR与NLR相关（rs=0.453,P<0.05）,PLR与NLRP3表达水平、NLR与NLRP3水平均无相关（P>0.05）。综上所述,NLRP3在早期宫颈癌中表达水平低于慢性宫颈炎、LSIL组,PLR、NLR在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL、早期宫颈癌中表达水平逐渐升高。而PLR、NLR及NLRP3是免疫及炎症相关的指标,这为清除hr-HPV病毒感染及阻断宫颈病变发生、发展提供新的理论思路。