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【目的】探索Exendin-4（Ex-4）处理后，内皮细胞一氧化氮(Nitric Oxide，NO)浓度变化的量效关系和时间关系。【方法】在DMEM（有钙）和RPMI1640（无钙）两种培养液中，培养内皮细胞[（人脐静脉血管内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）和猪髋动脉内皮细胞（pig iliac endothelium cells，PIEC）]。检测内皮细胞上的GLP-1受体。采用Griess法和DAF-FM DA（NO荧光探针）荧光比色法，测定Ex-4作用于内皮细胞后NO浓度变化，观察Ex-4干预与NO的浓度与时间关系。【结果】1. GLP-1受体在HUVEC和PIEC上均有表达，主要集中在细胞膜和细胞质。2. Ex-4适宜浓度粗筛实验（PIEC）提示，在DMEM和RPMI1640两种培养液中，1μg/ml及10μg/ml Ex-4处理组的NO升高位于量效曲线的峰段，10μg/ml Ex-4处理组NO升高较其他组更明显（P均＜0.05）；10μg/ml处理组中无钙培养液组较有钙培养液组NO升高更明显（P＜0.01）。Ex-4适宜浓度细筛实验（PIEC）提示，8μg/ml Ex-4处理组NO升高较其他各组更明显（P＜0.05），无钙培养液组较有钙培养液组NO升高更明显（P＜0.05）。3.用8μg/m1Ex-4处理PIEC后2，4，8，12，24小时测量NO，各时点NO均较对照组有所增加，8小时达峰（P＜0.05）。4. Ex-4处理HUVEC的实验也得到类似结果。【结论】1. GLP-1受体在HUVEC/PIEC两种不同种属的内皮细胞上均有表达。2. Ex-4可以增加内皮细胞NO释放，Ex-4的干预与内皮细胞NO释放有量效和时间关系。第二部分Exendin-4致内皮细胞NO释放与eNOS通路的关系【目的】从NO释放有密切关系的内皮型一氧化氮合酶（endothelial Nitric OxideSynthase，eNOS）通路角度，研究Ex-4引起内皮细胞NO释放的机制。【方法】将内皮细胞分为内皮型一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂左旋-硝基精氨酸甲脂（L-NAME）预处理组与对照组，测量Ex-4作用内皮细胞后NO产生的浓度变化。Western blot法测量Ex-4作用HUVEC后eNOS-Ser1177磷酸化变化。【结果】1. eNOS抑制剂L-NAME对Ex-4引起的内皮细胞NO释放有明显阻断作用。有钙和无钙两种培养液组均显示出：1、10、100μmol/l L-NAME预处理后，NO释放较对照组显著减少（P＜0.05）。2. Ex-4作用HUVEC后eNOS-Ser1177磷酸化显著增强。【结论】Ex-4通过eNOS通路，引起eNOS-Ser1177磷酸化，激活eNOS，从而引起内皮细胞产生NO。第三部分Exendin-4致内皮细胞NO产生与细胞内钙释放的关系【目的】从Ex-4引起内皮细胞NO产生与内皮细胞内钙变化的关系角度，研究Ex-4引起内皮细胞NO的产生机制。【方法】将PIEC分为L-NAME预处理组、Ex-4处理组和对照组，在RPMI1640培养液中培养。以DAF-FM DA为NO探针，以Fluo-3AM、Frua-2AM为钙离子探针，分别使用流式细胞仪、多功能酶标仪、激光共聚焦仪测量细胞内钙及NO。研究Ex-4引起内皮细胞NO产生与内皮细胞内钙变化的关系。【结果】1.与对照组相比，Ex-4处理组的细胞内钙浓度有显著升高（P＜0.05）。L-NAME预处理组NO及细胞内钙均无明显升高。2. Ex-4作用于内皮细胞后，内皮细胞内钙在NO释放前期的不同时段有不同的变化趋势。Ex-4引起内皮细胞NO释放前期的前段，细胞内钙有随时间斜行升高趋势（y=0.106x+1.326），NO释放中期前段（y=0.003x+0.374）及释放后期前段（y=-0.001x+0.324）细胞内钙变化曲线的斜率K<0.01、纵截距B<0.5，细胞内钙变化曲线趋近平坦。【结论】Ex-4作用于内皮细胞，升高细胞内钙浓度，使内皮细胞NO释放增加，细胞内变化是Ex-4引起内皮细胞NO释放相关的eNOS通路中的重要环节。