CMY-2型质粒AmpC酶的分子生物学研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaotre
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目的:研究哈尔滨医科大学附属二院临床分离到的革兰阴性杆菌质粒型AmpC酶基因的流行情况及基因型别特征,为临床合理用药提供依据。   方法:利用K-B法以头孢西丁≤17mm为标准,从临床分离的革兰阴性杆菌中筛选出可疑产AmpC酶菌株;EDTA纸片法确认产AmpC酶;多重PCR(Multiplex PCR.)扩增ampC基因分群及PCR产物测序以确定质粒AmpC酶基因型别,对检测到的CMY型AmpC酶进行全长编码基因克隆,测序并与已知染色体和质粒ampC基因对比明确其来源,分析基因特点。   结果:K-B法筛选312株可疑产AmpC酶菌株;经EDTA纸片法确认有106株产AmpC酶;多重PCR检测及初步测序,44株质粒基因阳性,其中40株为DHA型,4株CMY型基因。DHA型包括克雷伯菌21株,大肠杆菌8株,沙雷氏菌3株,枸橼酸杆菌1株,肠杆菌7株;CMY型均分布于大肠埃希菌中。对CMY型质粒AmpC酶进行全长基因克隆测序,结果与Genbank上肠沙门菌的质粒CMY-2型相比有一个碱基的突变,同源性为100%;与弗劳地枸橼酸杆菌染色体上ampC结构基因的同源性为93%。   结论:我院革兰阴性杆菌质粒型AmpC酶基因的流行情况趋于复杂化,应引起临床高度重视。
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