黑果枸杞叶多糖的分离纯化、分析鉴定及生物活性研究

来源 :西北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:z284769
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murray),属于茄科(Solanaceae)枸杞属(Lycium)植物,分布于我国青海、新疆等地。黑果枸杞果实具有很高的营养和药用价值,但其产量较低且价格昂贵。近年来研究发现,黑果枸杞叶片提取物也具有与果实相似的生物活性和营养药用价值,其中多糖类物质可能是其功效成分之一,而目前对黑果枸杞叶多糖的性质,结构和活性系统性研究报道相对较少。本文以青海柴达木盆地产黑果枸杞叶片为原料,对黑果枸杞叶多糖的提取、分离纯化、理化性质、结构、体外抗氧化活性和免疫活性进行系统研究,为进一步阐述多糖结构与功能关系奠定理论基础,也为黑果枸杞的综合开发利用提供科学依据。主要研究结果如下:1.黑果枸杞叶多糖的提取及分离纯化以黑果枸杞叶为原料,用热水提取、乙醇沉淀、Sevage试剂除游离蛋白质、过氧化氢脱色素、透析冻干后得到淡黄色粉末状的黑果枸杞叶粗多糖CLRLP。CLRLP经DEAE-52离子交换柱分离和SephadexG-100凝胶柱纯化后得到五个多糖组分,LRLP1-A、LRLP2-A、LRLP3、LRLP4-A和LRLP5-A。2.黑果枸杞叶多糖的理化性质研究采用高效凝胶色谱法、气相色谱、红外光谱等对黑果枸杞叶多糖的理化性质进行研究。结果表明,五个组分的黑果枸杞叶多糖都具有均一性,平均分子量依次为34.9kDa、 52.5kDa、79.4 kDa、135.1 kDa和197.5 kDa;都是以阿拉伯糖和半乳糖为主要组成的中性多糖。苯酚硫酸法测得其糖含量依次为96.8%、97.1%、98.2%、96.6%和95.1%;考马斯亮蓝法测得蛋白含量依次为2.1%、1.8%、1.3%、2.3%和3.9%。3.黑果枸杞叶多糖的结构采用甲基化、乙酰化、部分酸水解等化学分析方法和气相色谱、气相色谱-质谱联用、电喷雾电离质谱和核磁等仪器分析方法对黑果枸杞叶多糖的结构进行分析。结果显示,五个多糖组分均为具有多分支结构的阿拉伯半乳聚糖,且主链都由(1→6)Galp重复单元结构组成,并且大多数的半乳糖C-3位存在分支;而各组分的支链却差异很大,主要表现在糖组成、连接方式、聚合度等方面;非还原末端以Araf为主。4.黑果枸杞叶多糖的体外抗氧化活性采用还原能力、清除自由基能力、对Cu2+/H2O2损伤BSA蛋白的保护及对H2O2损伤HeLa细胞的保护评价方法,对黑果枸杞叶粗多糖CLPRP及各纯化组分多糖进行体外抗氧化活性分析。结果显示,它们在不同考察水平中均具有不同程度的抗氧化能力。其中,组分LRLP3在还原能力、清除羟自由基、清除超氧阴离子自由基及对H2O2诱导的HeLa细胞损伤的保护方面抗氧化活性表现最强;组分LRLP2-A对Cu2+/H2O2诱导的BSA蛋白氧化损伤的保护作用最强;组分LRLP4-A清除DPPH自由基的能力最强;粗多糖CLRLP除了在羟自由基清除方面,其它方面的抗氧化活性与各组分多糖相比均最弱。5.黑果枸杞叶多糖的体外免疫调节活性采用体外脾淋巴细胞和小鼠巨噬细胞RAW 264.7免疫活性实验对黑果枸杞叶粗多糖及各组分多糖的免疫活性进行评价。结果表明,粗多糖和各组分多糖均具有不同程度的免疫调节功能。黑果枸杞叶多糖对未经诱导和经ConA或LPS诱导的正常小鼠体外脾淋巴细胞增殖具有显著的促进作用;其中,组分LRLP4-A的促进增殖作用最强;粗多糖CLPLR促进增殖作用最弱。此外,黑果枸杞叶多糖可以激活小鼠RAW 264.7巨噬细胞,增强其吞噬能力,促进NO及细胞因子TNF-α分泌能力,还可增强RAW 264.7细胞的细胞毒活性,通过免疫活性因子间接发挥抗肿瘤作用;LRLP3刺激RAW 264.7后,细胞内的iNOS和TNF-α mRNA表达量升高。在巨噬细胞免疫活性实验中,组分LRLP3的免疫活性最高,而粗多糖CLRLP的免疫活性最低。
其他文献
在新时代教育的不断改革之下,各种各样的教学方式方法如雨后春笋般不断地涌现出来,案例教学法经过不断的研究和实践验证已经在学术界得到了很多学者们的一致好评.所以,作为一
在小学数学教学的过程中,课堂提问起到非常关键的作用.教师知道如何进行课堂整体设计,如何合理安排时间,如何进行合理有效的课堂提问,才能激发学生的学习兴趣,提高学生的学习
目的观察内服五味消毒饮加减配合外用胰岛素治疗糖尿病皮肤溃疡的临床疗效。方法将64例糖尿病皮肤溃疡住院患者按入院顺序随机分为对照组和治疗组各32例,对照组给予西医常规
<正>老年人是社区卫生服务的最大接受群体[1]。随着社会发展、人口老龄化进程的加快以及农村大量富余劳动力进城务工,农村老年人的比例逐渐增多,为了解徐州农村社区老年人健
目的:探究孕产妇情绪评估及个性化干预对降低产后抑郁症的作用。方法:本次研究对象选择2018年10月至2019年10月于本院接受诊断治疗的140例SDS评分在42~52分的产妇,将所有接受
目的:探讨腹腔镜术联合醋酸甲地孕酮治疗早期子宫内膜癌的疗效。方法:将102例患者随机分为研究组和对照组。对照组51例,予以腹腔镜术及术后化疗;研究组51例,予以腹腔镜术及醋
会计专业教育要求培养适应社会经济发展需求的会计人才。文章提出了一个平台,两个能力,三方合作,四个实践教学环节的教学模式,以期改变学生实践能力不足的现状。
<正>近年来,人事部党组中心组围绕提高党的执政能力,坚持以邓小平理论、"三个代表"重要思想和党的路线方针政策为基本内容,坚持自学和集中研讨相结合,努力做到"五个注重",通
<正>大庆市委组织部为了更有效地从组织上、人才上保证大庆经济发展目标的实现,近年来,他们不断研究和探索干部制度改革的方法,逐年加大改革的力度,到目前为止,已初步形成了
历史故事占据了历史教学的很大一部分,了解历史故事有利于学生理解这一历史时期的发展与特点,了解历史故事更有利于学生记忆相关历史知识点.与此同时,故事一直用它的有趣性在