小菜蛾Plutella xylostella是鳞翅目Lepidoptera属,菜蛾科Plutellidae,主要为害十字花科蔬菜,小菜蛾等昆虫的初孵幼虫首先吃掉各自的卵壳,然后为害蔬菜叶片,针对此现象,本研究以卵表和叶表细菌为内容展开研究,探究叶表和卵表是否产生影响小菜蛾行为微生物。本研究采用传统的平皿培养方法,分离出了叶表细菌和卵表细菌,通过全部基因组的提取、PCR和16S rDNA测序实验来鉴定细菌,在NCBI数据库blast比对,在属水平上对细菌进行分析;另外采用非培养法Illumina HiSeq测序技术对叶表细菌16S rDNA-V4变异区序列测序分析叶表细菌群落多样性,非培养法分离细菌的过程中,在延用普遍的提取叶表细菌总DNA的基础上,采用了新的方法即直接用菌体本身分析叶表细菌;用传统分离细菌方法分离到46株叶表细菌和4株小菜蛾卵表细菌,叶表细菌分配到18个属,卵表细菌分配到2个属;高通量测序分析采用新的方法,与普遍的方法相比,叶绿体污染少、细菌群落多样性也相对较丰富,分析叶表丰度排名前10的优势属,用传统培养方法分离的细菌与之有相似属。为了筛选分离的细菌中是否存在对小菜蛾吸引作用的细菌,设计了筛选装置,筛选装置包括陷阱A和B、选择孔及气味选择区三个部分,陷阱A和B分别用于放置样品用于放置气味样品,陷阱可捕获试虫,实现无人值守筛选;选择孔链接气味选择区与陷阱,较小的相互靠近的选择孔提高了选择精度,与陷阱底部有较高落差,避免试虫返回气味选择区,位于气味选择区域中部,避免侧向光线引起的筛选误差;较小的高度,利于气味分子在空间中扩散,较大的面积,提供足够活动空间,给与试虫选择自由,提高选择精度。为了验证筛选装置的可靠性,采用小菜蛾喜食植物白菜叶进行实验,结果表明该装置是可靠的,可用来筛选吸引小菜蛾的细菌。采用共同设计的装置筛选吸引小菜蛾的细菌,每株细菌设置三个重复,初筛结果表明蔬菜表面4株细菌和卵表1株细菌对小菜蛾3龄幼虫具较强吸引,复筛后除了小菜蛾卵表细菌吸引作用没有下降外,其他4株细菌都出现了下降趋势。为了验证本次试验的准确性,采用了第二种设计好的视频采集仪进行筛选,结果表明了对小菜蛾3龄幼虫具有明显的吸引效果的是小菜蛾卵表细菌,16Sr DNA最后将其鉴定为假单胞菌,细菌抗生素敏感试验结果显示:氨苄、氯霉素、四环素都具有抗性,对卡纳霉素、利福平没有抗性;为了进一步验证该细菌的功能,在白菜田间试验中采用了五种不同的方法对小菜蛾进行诱集,四种方法分别为:浓缩(离心)的菌、12 h的细菌发酵液、24 h的细菌发酵液、划线,阳性对照为诱芯,阴性对照为无菌水,四种不同的方法相比较,24 h的发酵液有一定的诱集效果,但与阳性对照诱芯相比,诱集的小菜蛾数目极少。对该细菌全基因组测序分析结果表明,其基因组大小为6 499 289 bp,由一个质粒和一个染色体组成,基因注释分析得到了6 132个基因,KEGG库对染色体基因进行功能注释,得到多酮类化合物和萜类化合物代谢通路可能与细菌挥发物相关。