林蛙是一种在我国东北地区普遍存在的珍贵的营养品,多用于制备林蛙油等产品。林蛙胶原蛋白多肽是以生产林蛙油的副产品─林蛙残体为原料,经过酶解提纯得到的高活性生物制品。本研究从胶原蛋白多肽出发,将其与亚铁离子螯合,合成制备出一款功能性多肽补铁剂,以改善当今社会广泛存在的缺铁性贫血的现状。该产品相对于前几代补铁剂,对人体胃肠道不产生刺激作用,适口性好,易于储存和运输。本论文的主要研究结果如下:1.选取林蛙胶原蛋白多肽与氯化亚铁进行螯合,制备出林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物;通过邻菲啰啉比色法绘制出铁的标准曲线,从而计算出螯合物中的铁含量。通过单因素试验依次考察了林蛙胶原蛋白多肽浓度、p H值、抗坏血酸浓度、反应时间和反应温度对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物螯合率的影响,并选取了其中影响较大的四个因素进行了四因素三水平的正交优化试验。最终得到制备林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物的最优工艺参数:林蛙胶原蛋白多肽浓度为9%、p H值为5、抗坏血酸浓度为2.5%、反应时间为80 min、反应温度为50℃。2.为提高产物的抗氧化性,增强细胞膜的流动性,对原料林蛙胶原蛋白多肽进行了糖基化修饰,再选取修饰后的林蛙胶原蛋白多肽与亚铁离子进行螯合制备多肽亚铁螯合物。通过单因素试验依次考察了糖的种类、多肽和糖的比例、p H值、反应温度和反应时间对糖基化修饰后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物螯合率的影响,并选取了其中影响较大的四个因素进行了四因素三水平的正交优化试验。通过正交优化试验选择出制备糖基化修饰后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物的最佳工艺参数,其最优参数如下:选择葡萄糖进行糖基化修饰,多肽与糖的比例为1:1、p H值为7、反应温度为70℃、反应时间为18 h。3.通过硫化钠法对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物的成分进行了定性研究,确定螯合物中不存在游离的多肽,进而确定多肽与亚铁离子已充分螯合;通过紫外扫描和红外光谱分析,对螯合前后的物质进行了结构上的鉴定,根据峰值的不同及其变化特征,确定螯合产物的生成;通过一系列实验对产物进行了抗氧化性的测定。分别比较、测定了糖基化修饰前后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物对DPPH、羟自由基、超氧阴离子的清除能力及其还原能力。实验结果表明,通过糖基化修饰后的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物在以上几方面的能力均显著高于未进行糖基化修饰的林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物,说明糖基化修饰有利于提高物质的抗氧化性。同时得出结论:当糖基化修饰后的螯合物浓度为4 mg/m L时,其对DPPH、羟自由基和超氧阴离子的清除能力最强;其还原能力与浓度成正比。4.采用锐孔-凝固浴法制备林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊。首先通过单因素试验依次考察了海藻酸钠浓度、芯壁比、反应温度和氯化钙浓度对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊的包埋率的影响,并在单因素试验的研究基础上,采用响应面法对林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊的制备工艺进行优化。以海藻酸钠的浓度、芯壁比、反应温度、氯化钙浓度为响应因子,林蛙胶原蛋白多肽亚铁螯合物微胶囊的包埋率为响应值建立二次回归方程。得到方程:Y=85.36-0.29A+0.88B-0.76C+1.09D+0.45AB+1.15AC+0.72AD-1.19BC-0.21BD+0.23CD-11.42A2-6.28B2-5.05C2-7.38D2。本实验所选用的模型显著(P<0.05),拟合度较好,预测值和实验值的相关度非常好。通过响应面软件得到的最佳工艺条件:海藻酸钠的浓度为2.96%,芯壁比为0.41,反应温度为45.8℃,氯化钙的浓度为4.28%。由回归方程确定的制备多肽亚铁螯合物微胶囊的包埋率最高为85.46%,并且可信度为99.3%,具有良好的模拟性。