【摘 要】
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目的:1、建立慢性实验性糖尿病大鼠(chronic experimental diabetic rat,CEDR)和非糖尿病大鼠(non-diabetic rat,NDR)局灶性脑缺血再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,CUR
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目的:1、建立慢性实验性糖尿病大鼠(chronic experimental diabetic rat,CEDR)和非糖尿病大鼠(non-diabetic rat,NDR)局灶性脑缺血再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,CUR)模型,并分析比较影响模型制备成功的因素。2、观测VEGF、CD31在CEDR及NDR局灶性CI/R模型中的表达,并分析在相同CI/R损伤情况下,VEGF、CD31在两类大鼠表达不同的原因。 方法:1.慢性实验性糖尿病大鼠模型的制备:140只体质量为180～220g的雄性Wister大鼠禁食12小时后,于腹腔内一次性注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 55mg/kg,普通饮食饲养42～47天,在饲养过程中每7天饮水中给予2次庆大霉素(6.4×10~4U/只)。注射链脲佐菌素后每周断尾取血测定1次血糖值及体质量,及时淘汰不成模大鼠。并将成模后体质量为240～310g、血糖水平在13.5～25.6mmol/L的糖尿病大鼠(diabetic rat,DR)进一步制作CI/R模型。 2.脑缺血再灌注模型的制备:将成模的体质量为240～310g的CEDR和NDR各90只,按照体重、血糖值分别随机分为空白对照组、假手术组、脑缺血再灌注1h、3h、6h、12h、24h、72h、168h各9组,每组大鼠10只。采用Longa线栓法分别制作各组DR、NDR局灶性CI/R模型,并用Longa神经功能评分标准,比较两类大鼠模型制备成功率,分析两类大鼠模型制备失败及死亡原因。 3.VEGF、CD31表达的测定:DR和NDR各9组分别制作CI/R模型后,分别断头取脑,用组织切片机自前脑额极起切取6片冠状切片,层厚2mm,取第4片脑切片置于10%甲醛固定液中固定,石蜡切片,采用免疫组化的方法染色,
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