神经系统和血管系统的形成都是胚胎发育早期的重要事件。两者并不是孤立的过程,而是相互有机结合在一起的。在生物体内,神经和血管不但距离很近,而且彼此之间存在很多的关联。一些在神经发育中十分重要的导向因子,同样在血管的形成过程中担当不可或缺的角色。Slit/Robo信号作为“神经导向因子”在神经系统发育中具有导向轴突生长和排斥神经细胞迁移的重要作用,该信号还有抑制白细胞的趋化功能和促进肿瘤血管发生的作用。但是,Slit/Robo信号在胚胎血管发生过程中的作用如何?Slit是否可以通过结合Robo吸引血管内皮细胞的迁移,促进胚胎血管的发生,目前尚不清楚。而鸡胚作为经典的胚胎生物学模型被用来研究发育生物学现象已有多年历史,具有周期短、成本低等优势,尤其方便进行显微手术操作。本课题拟利用鸡胚模型研究Slit/Robo信号在原肠胚时期对血管发生的作用和对胚胎发育的影响以及可能的分子机制。我们通过检测Slit/Robo信号在原肠期的蛋白和mRNA时空表达谱,证实了Slit/Robo信号通路参与了原肠胚血管发生的过程。我们利用基因转染技术转染Robo1-siRNA降低了鸡胚胎细胞内的Robo1表达水平,发现Robo1的表达被抑制后,胚胎发育状况较差,血管网面积减小,血岛数目显著减少,而且形态不规则,细胞间隙不清晰。我们采用卡红染料,首次建立了对胚胎血岛的特异染色方法。卡红染色结果发现转染组的血岛的面积和数目明显小于对照组。为了进一步验证上述结果,我们选用了标记血岛的特异性标记分子VE-cadherin的探针进行检测,同样验证了这一结果。经统计学分析,组间的血管密度具有显著差异。综上所述,我们通过鸡胚模型,发现Slit/Robo是调节胚胎血管发育的重要信号通路,通过下调Robo1的表达可以明显抑制原肠期血管生长。这个发现有助于更全面深入了解Slit/Robo信号通路在血管发生中的功能和分子机制。结论:Slit/Robo信号通路对原肠胚血管发生起重要作用,Robo1的表达下调可以明显抑制原肠胚血管形成。