【摘 要】
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竹节参的主要活性成分是皂苷类物质。本文研究了人工培植竹节参的总皂苷提取纯化工艺及其体外抗氧化的能力。通过对加热回流提取、超声法提取、微波法提取竹节参总皂苷工艺条件的优化,得出较佳的提取方法为微波法提取;优化出D101大孔吸附树脂富集纯化竹节参总皂苷的工艺条件;采用HSCCC技术从竹节参总皂苷中分离出人参皂苷Rgl;对比了竹节参总皂苷纯化前后清除自由基的能力。1.加热回流提取竹节参总皂苷工艺条件的优
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竹节参的主要活性成分是皂苷类物质。本文研究了人工培植竹节参的总皂苷提取纯化工艺及其体外抗氧化的能力。通过对加热回流提取、超声法提取、微波法提取竹节参总皂苷工艺条件的优化,得出较佳的提取方法为微波法提取;优化出D101大孔吸附树脂富集纯化竹节参总皂苷的工艺条件;采用HSCCC技术从竹节参总皂苷中分离出人参皂苷Rgl;对比了竹节参总皂苷纯化前后清除自由基的能力。1.加热回流提取竹节参总皂苷工艺条件的优化在单因素试验的基础上确定四因素(提取时间、提取次数、料液比和乙醇浓度)三水平正交试验,优化出加热回流提取的较佳工艺条件为:提取时间120min,提取三次,料液比1:12,乙醇浓度为70％,总皂苷得率达14.97%;各因素对竹节参总皂苷得率影响的顺序为:提取次数>乙醇浓度>料液比>提取时间。2.超声法提取竹节参总皂苷工艺条件的优化在单因素试验的基础上确定四因素(提取温度、提取时间、料液比和超声频率)三水平正交试验,优化出超声法提取竹节参总皂苷的工艺条件为:料液比1:20,提取温度50℃,超声频率32KHz,提取三次,每次30min,乙醇浓度为70%,竹节参皂苷得率12.18%;各单因素影响竹节参总皂苷得率顺序为:超声频率>料液比>提取时间>提取温度,其中超声频率对竹节参总皂苷得率影响显著。3.微波法提取竹节参总皂苷工艺条件的优化在单因素试验的基础上利用SAS软件,以竹节参总皂苷得率为响应值设计了三因素(提取温度、提取时间、料液比)三水平响应面试验,经过岭嵴分析优化出微波法提取竹节参总皂苷的工艺条件为:提取温度65℃,料液比1:13,提取时间4.2min,提取三次,竹节参总皂苷的实际得率为24.19%。对比三种竹节参总皂苷提取方法,微波法具有皂苷得率高、成本低、高效等优点。4.D101大孔吸附树脂富集纯化竹节参总皂苷工艺条件的研究均匀试验设计优化出D101大孔吸附树脂纯化竹节参总皂苷的条件为:50%乙醇洗脱,洗脱剂用量17.11BV,洗脱流速1.25BV/h,上样量1.04BV。竹节参总皂苷的纯度达90%以上。用薄层层析检测竹节参皂苷,展开剂为氯仿-甲醇-水(7:3:0.5v/v)溶剂系统的上相,并用高效液相色谱对照。5.利用高速逆流色谱从竹节参总皂苷中分离出人参皂苷Rg1利用HSCCC技术,从经过D101大孔吸附树脂富集纯化的竹节参总皂苷中分离出人参皂苷Rg1。经过筛选得到较佳的溶剂系统为氯仿-甲醇-水(7:3:1v/v)溶剂系统。Rg1在该溶剂体系中的保留时间为(170±10)min。HSCCC技术与传统的硅胶柱层析法相比,具有简单易行,分析时间短,分离成本低等优点。6.竹节参总皂苷体外抗氧化的研究通过对纯化前后竹节参总皂苷清除自由基的比较,证明竹节参总皂苷具有一定的体外抗氧化作用。对不同的自由基,其清除能力不同。对超氧自由基的清除作用比较明显,并且纯化后的明显高于纯化前的竹节参总皂苷;对DPPH的清除作用,纯化后的竹节参总皂苷随竹节参皂苷浓度的增加而增加,纯化前的竹节参总皂苷随浓度的升高而降低;纯化前的竹节参总皂苷对羟基自由基的清除作用明显,并随竹节参总皂苷浓度的增加而升高,而纯化后的竹节参总皂苷对羟基自由基的清除作用不明显。
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