Beclin 1沉默对维生素K3诱导的人肝癌细胞损伤的影响

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肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,近年来其发病率有上升的趋势。因此,深入研究肝癌的分子机制,从分子水平和基因水平上发展出更有效的治疗手段越来越受到重视。本研究探讨不同浓度VK3对人肝癌细胞SMMC-7721损伤影响,以及Bcl-2和Bax表达的变化。利用RNAi技术,建立自噬基因Beclin 1沉默的人肝癌细胞SMMC-7721模型系统。进一步研究自噬抑制对VK3诱导的人肝癌细胞SMMC-7721损伤的影响以及在此过程中自噬和凋亡的关系。研究结果表明:VK3能够诱导人肝癌SMMC-7721细胞损伤,并呈剂量相关性。机制可能与下调Bcl-2、上调Bax mRNA和蛋白表达有关;利用RNAi技术成功构建pSH1Si-Beclin 1表达载体,转染人肝癌SMMC-7721细胞后,可显著抑制Beclin1 mRNA和蛋白表达;RNAi沉默Beclin1表达以及应用自噬特异性抑制剂3-MA,显著降低人肝癌SMMC-7721细胞自噬能力,促进VK3诱导的SMMC-7721细胞凋亡,提示自噬在VK3诱导人肝癌细胞SMMC-7721损伤中很可能是一种细胞的自我保护机制。这一实验结果对探讨Beclin 1在肝癌发病过程中所发挥的作用进行了新的探索,也为寻找肝癌基因治疗新的作用靶点进行了有益的尝试,细胞通过自噬提供能量促进细胞生存,能在一定程度上拮抗氧化应激造成的细胞损伤,从而推测肝癌治疗中利用自噬抑制结合抗癌药物的方法很可能是一种新的治疗手段。
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