作为西北荒漠和盐碱地治理的先锋植物和建群植物,枸杞以其优越的防风固沙、改良土壤和改善生态环境等生态效益,以及食用、营养和药用价值等近年来得到人们的热切关注。为了解决盐碱地改良中枸杞种质的合理选择问题,本研究在探究20份枸杞种质资源对盐胁迫生理响应的基础上,结合主成分分析和聚类分析等统计软件,确定了不同枸杞种质的抗盐性强弱,建立了一套简便可靠的枸杞抗盐种质资源筛选评价体系。使用RACE方法克隆了枸杞的HKT1、NHX1和SOS1基因,并对其做了生物信息学分析,验证了三个抗盐基因在枸杞中的表达特点,在此基础上将抗盐基因转入拟南芥做后续抗盐鉴定。取得结果如下:(1)通过对300m MNaCl处理下20个枸杞种质叶片中K~+/Na~+、叶绿素、甜菜碱、丙二醛、GSH含量和细胞膜相对透性等生理指标和三个抗盐基因HKT1、NHX1和SOS1的表达量分析,使用主成分分析和聚类分析相结合的方法,将10个抗盐相关的生理指标降维为具有代表性的4个新主成分。利用主成分分析结果对20个枸杞种质抗盐能力进行排序,由强到弱的顺序为:黑果枸杞>宁杞2号>北方枸杞>宁杞1号>白条枸杞>大麻叶>中国枸杞>宁杞菜1号>蒙杞1号>宁杞5号>白花枸杞>M1>圆果枸杞>HGB>紫柄枸杞>宁夏黄果>红枝枸杞>云南枸杞>小麻叶>宁杞7号。根据聚类分析结果将20个枸杞种质的抗盐等级分为高抗、中抗、较敏感和最敏感四大类。(2)克隆到枸杞HKT1、NHX1和SOS1三个抗盐基因的全长,明确了5’UTR及3’UTR区域的序列及3’UTR区的AATAA加尾信号。通过多序列比对发现三个基因和它们编码的蛋白序列与烟草、番茄和土豆等茄科植物同源性较高,且都定位于膜结构,除SOS1蛋白外都是亲脂蛋白。对保守结构域和空间结构预测发现,枸杞HKT1蛋白具有TrkH蛋白家族的保守结构域和空间结构,而NHX1和SOS1蛋白具有Na~+/H~+转运体结构域和空间结构。(3)以筛选到的最抗盐品种‘黑果枸杞’为材料做三个基因的定量表达分析,发现它们在枸杞幼苗中的表达具有组织特异性,在叶片中的响应比在根和茎中变化更大,不同时间动态下的三个基因相对表达规律相似,均在盐胁迫24h时达到最大。(4)已将枸杞HKT1和NHX1基因构建到植物双元过表达载体pCAMBIA1304上,并转化到农杆菌中,用浸花法转入拟南芥野生型Col-0中,通过抗生素筛选和PCR鉴定各筛选出T1代阳性苗,用于后续功能验证。