光谱法研究抗生素类药物与牛血清白蛋白的相互作用

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本文利用荧光光谱法及紫外光谱法研究了头孢唑林钠与洛美沙星间的拮抗作用、磺胺嘧啶与环丙沙星间的协同作用以及镉离子存在下头孢米诺钠与牛血清白蛋白间的相互作用,均求得各种配体与蛋白结合的荧光猝灭常数、结合常数、作用力大小、结合距离和结合位点。同步荧光、三维荧光和圆二色谱表明在研配体可以改变蛋白质的构象。全文分以下四章:第一章:概述了血清白蛋白和抗生素的简介,荧光光谱法结合紫外光谱法和圆二色谱法研究药物与蛋白间相互作用的原理,以及本文的研究内容和研究意义。第二章:利用荧光光谱法结合紫外光谱法、圆二色谱法,在模拟人体生理条件下研究了头孢唑林钠和洛美沙星同时与牛血清白蛋白的相互作用。两种药物与牛血清白蛋白的相互作用结果表明均发生了静态猝灭,分别测定了各种体系的荧光猝灭常数、结合距离和结合常数。两种药物与牛血清白蛋白的结合能力:洛美沙星>头孢唑林钠;二者共存分别大于二者单独与牛血清白蛋白作用。综合分析各种实验测的参数及图得出头孢唑啉钠与洛美沙星间存在拮抗作用。第三章:利用荧光光谱法结合紫外光谱法、圆二色谱法,在模拟人体生理条件下研究了磺胺嘧啶单独与牛血清白蛋白、环丙沙星单独与牛血清白蛋白、磺胺嘧啶和环丙沙星同时与牛血清白蛋白等的相互作用。两种药物与牛血清白蛋白的相互作用结果表明均为静态猝灭,分别测定了各种体系的荧光猝灭常数、结合常数和结合距离。两种药物与牛血清白蛋白的结合能力:磺胺嘧啶大于环丙沙星;二者共存分别小于二者单独与牛血清白蛋白作用。利用华法令、地高辛、布洛芬作为位点试剂所做的竞争实验结果表明与磺胺嘧啶和环丙沙星的主要结合位点均位于同一位点:BSA的位点Ⅱ,进一步验证二者共存与BSA作用时的协同性。综合分析各种实验测得参数及图得出磺胺嘧啶与环丙沙星间存在协同作用。第四章:利用荧光光谱法结合紫外光谱法、圆二色谱法,在模拟人体生理条件下研究了头孢米诺钠(Cefminox)与牛血清白蛋白的相互作用,以及Cd离子对Cefminox与BSA相互作用的影响。分别测定了不同温度下Cefminox-BSA体系的猝灭常数、结合常数和热力学参数,确定Cefminox-BSA体系的猝灭机制为静态猝灭,确定了Cefminox与BSA之间的作用力主要为范德华力和氢键,Cefminox在BSA上的结合位置主要是亚构域ⅢA,根据Stern-Volmer非辐射能量转移机理,计算得出头孢米诺钠与牛血清白蛋白间结合距离为1.09nm。并且研究了镉的存在下,头孢米诺钠与牛血清白蛋白的作用。用同步荧光法、三维荧光光谱和圆二色谱考察了Cefminox以及Cd存在下BSA构象变化。
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