GRM5在人胶质瘤中表达及其与胶质瘤U251细胞迁移及侵袭能力关系的研究

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研究目的:1.研究GRM5(代谢性谷氨酸受体5)在胶质瘤表达与胶质瘤病理级别的相关性;2.研究GRM5对胶质瘤U251细胞的迁移及侵袭能力的影响。研究方法:1.为了研究胶质瘤组织中GRM5表达情况,我们收集了本院神经外科13例胶质瘤标本,所有标本均依据2007年世界卫生组织(World Health Origanization,WHO)中枢神经系统肿瘤分类标准进行病理诊断并分级。应用免疫组化的方法检测胶质瘤标本中GRM5的表达情况。2.为了研究GRM5对胶质瘤U251细胞的迁移能力的影响,我们设计合成了2条特异性针对人GRM5基因的小分子干扰RNA(GRM5-siRNA-1247,GRM5-siRNA-1587),及对照RNA(GRM5-siRNA-NC);转染U251细胞株48h后用Western blot(蛋白质印迹法)检测GRM5的表达情况;3.用转染后的U251细胞做划痕实验和Tanswell实验,验证转染小分子RNA(GRM5-siRNA-1247,GRM5-siRNA-1587),干扰GRM5表达后U251细胞的迁移和侵袭能力的影响。实验结果:1.免疫组化结果显示GRM5在人低级别和高级别胶质瘤中均有表达,且随肿瘤级别增高,表达量也增高,结果具有统计学意义(P<0.01)。2.Western Blot实验结果显示U251细胞转染小分子干扰RNA(GRM5-siRNA-1247)后GRM5表达量明显降低,差异具有统计学意义(t=3.020,P<0.05)。3.划痕实验结果显示U251细胞转染小分子干扰RNA(GRM5-siRNA-1247)后,细胞划痕伤口愈合率明显低于对照组,差异具有统计学意义(24h t=6.751,P<0.01;48h t=8.668 P<0.01)。4.Tanswell实验结果显示U251细胞转染小分子干扰RNA(GRM5-siRNA-1247)后,细胞侵袭能力明显低于对照组,差异具有统计学意义(t=20.726,P<0.01)。结论:1.GRM5在各级别胶质瘤中都有表达,且表达量与胶质瘤级别呈正相关。2.GRM5能促进胶质瘤U251细胞迁移及侵袭的能力。
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