【摘 要】
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激光诱导荧光检测(LIF-D)是目前灵敏度最高的检测技术之一,检出限为nmol/L~pmol/L。目前LIF-D系统存在的主要问题是体积大,价格昂贵,结构复杂等,难以实现整个分析系统的微型化。本课
【出 处】
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中国科学院研究生院(大连化学物理研究所)
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激光诱导荧光检测(LIF-D)是目前灵敏度最高的检测技术之一,检出限为nmol/L~pmol/L。目前LIF-D系统存在的主要问题是体积大,价格昂贵,结构复杂等,难以实现整个分析系统的微型化。本课题的目的是促进该项检测技术国产化,得到较高性能/价格比的检测器。 用发射波长为635nm的半导体激光器(LD)为激发光源和共聚焦光学结构,研制成功小型化LIF-D系统。优化了各部件间的相互配置。以Cy5为标样,得到了3.7nM的浓度检出限(CLOD)。与进口的同类仪器相比,该系统具有较好的性价比。 在上述工作的基础上,利用两种不同发射波长(532nm、473nm)的半导体激光-泵浦固体激光器(LD-DPSSL)为激发光源,共聚焦光学结构,研制了小型可便携的LIF-D。整机采用模块化设计,使部分模块通用;检测池作为一个独立的模块与之分立。换用适配的检测池,就可以分别应用于HPLC,CE,μ-TAS等分离系统。以Rh B和FITC为标样,两台LIF-D的CLOD分别为0.3nM和5pM;设计了一种新型共聚焦LIF-D-HPLC柱后检测池。它具有柱外效应小、易于加工和便于更换的特点。 探讨了用半导体发光二极管(LED)为诱导光源,研制微型荧光检测器的可行性。采取了三个措施来提高检测灵敏度:用脉冲电流驱动和减少保护层厚度来提高LED有效输出光强、球型光纤头来提高荧光收集效率,用针孔降低杂散光。以荧光素为标样,该检测器的CLOD和最低检出质量分别为0.18μM和4.3fmol,接近于普通荧光检测器的性能;设计的T型光学校准设备可实现柱上荧光检测系统的光学校准;另外,设计了两种不同结构的新型荧光光度计。
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