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目的:建立125I粒子放射性肺损伤比格犬模型后,以麻杏石甘汤为对比干预措施,观察比格犬一般情况及血常规的动态变化,同时观察犬正常肺组织处于125I粒子辐射一个半衰期(59.6d)所受放射性损伤的病理HE及电镜图片结果,探究麻杏石甘汤对放射性肺损伤的干预作用,并探讨其可能作用机制。
方法:(1)分组:将6只体重11.9~13.2kg的比格犬随机分为模型A组及中药B组各3只。将模型A组及中药B组沿比格犬右侧腋前线第6肋间,垂直皮肤,深度约3cm左右的同一位置植入125I粒子,建立125I粒子放射性肺损伤比格犬模型,造模成功后中药B组第二天开始按照1.12ml/Kg·d,5d/w的给药计划实行灌胃给药麻杏石甘汤,模型A组给予同等份量蒸馏水灌胃。(2)观察指标:①每周定时观察犬的一般状态如活动精神状态、皮毛毛色、饮食、呼吸、大小便等情况。②造模成功后第7、14、21、30、45、60天检查各组比格犬体重及血常规白细胞数值并记录。③植入粒子后第7d及第60d检查CT,确认粒子位置,并应用TPS计算等剂量曲线。在实验中心条件下正常喂养60天后处理全部实验比格犬,按第60d复查所得CT将其图片传入TPS粒子植入计划系统,进行验证,第60d刚好一个半衰期,处理实验犬后验证粒子活度基本在1.0mci左右,可按开始的2.0mci和1.0mci来计算距离粒子5mm位置的两次等剂量曲线(如图6),两次剂量曲线的差值可得出2个月内该位置所受辐射剂量约为:233Gy-120Gy=113Gy。即我们观察正常犬肺组织在113Gy的辐射剂量下的病理改变。④对各组比格犬右肺观察区域及对侧左肺同一位置肺组织同步进行取材,将两组比格犬的空白左肺分别作为自身对照的空白组,即模型A组与空白A组,中药B组及空白B组,作为四组标本同步行HE病理及电镜检查。
结果:1.比格犬各组一般情况:除了在造模后一周内,模型A组与中药B组均有不同程度的精神不佳、饮食稍差外,其余时间6只比格犬相互之间精神、进食、大小便及毛色等均无明显异常,5-7天后两组基本恢复正常,体重开始增加明显,模型A组及中药B组对比无较大差异(P>0.05);2.模型A组比格犬白细胞水平波动较明显,可以看出模型A组与中药B组几乎都在造模成功后第7d均出现白细胞的升高,且两组间比较无统计学意义(P<0.05),提示可能存在粒子植入手术影响导致的局部炎症反应,而随后两组在第14d时均出现白细胞水平下降也证明了这一点。随后,模型组和中药组比格犬白细胞水平呈逐步上升趋势,可能与辐射损伤所致放射性炎症相关,这与鞠等人[1]发表研究相似。第45d及第60d中药B组对比模型A组白细胞水平出现明显降低(P<0.05)。其他时间点两组比较无统计学意义(P>0.05)。3.CT检查:造模后第7d查CT两组CT图像未见明显变化;两组在60d时均发现只有在粒子极近处出现类似水肿、渗出等密度状超过肺组织,中药B组粒子周边所形成的类结缔组织较模型A组范围稍小。其余正常肺部组织未见明显异常;4.病理改变:空白A组及空白B组在镜下未见明显异常表现,两组相比较均未见明显病理改变。模型A组与中药B组均可见慢性炎细胞浸润,局部间质纤维化,细胞的水肿、变性;肺泡结构不清晰;静脉血管扩张,内皮细胞部分脱落;肺粘膜局部绒毛脱落;纤维组织增生,伴有部分肌层增厚等病理改变,但中药B组损伤程度整体较模型A组轻;5.电镜表现:空白A组及空白B组在各个倍数下未见明显异常表现。模型A组与中药B组在不同倍数下均显示细胞核中染色体存在固缩、边集化,内质网肿胀,大量空泡化线粒体,自噬体的出现,提示可能存在细胞修复动作。电镜下中药B组与模型A组肺损伤对比较HE明显,特别是线粒体损伤更加敏感,中药B组线粒体空泡化较模型A组减少明显,且少数线粒体仅出现部分嵴溶解、消失(均质状)。
结论:1.125I粒子植入比格犬肺组织可成功制作125I粒子放射性肺损伤比格犬模型,且验证了在治疗剂量下对正常肺组织的安全性。2.麻杏石甘汤对放射性肺损伤的干预作用是积极的,有一定的防治作用;3.麻杏石甘汤防治放射性肺损伤可能是通过可能是通过抑制抑制白细胞及炎性因子、改善炎细胞浸润及纤维组织增生,还有减轻染色体的固缩及边集化、保护线粒体的作用来发挥其对RILI的积极的干预作用。
方法:(1)分组:将6只体重11.9~13.2kg的比格犬随机分为模型A组及中药B组各3只。将模型A组及中药B组沿比格犬右侧腋前线第6肋间,垂直皮肤,深度约3cm左右的同一位置植入125I粒子,建立125I粒子放射性肺损伤比格犬模型,造模成功后中药B组第二天开始按照1.12ml/Kg·d,5d/w的给药计划实行灌胃给药麻杏石甘汤,模型A组给予同等份量蒸馏水灌胃。(2)观察指标:①每周定时观察犬的一般状态如活动精神状态、皮毛毛色、饮食、呼吸、大小便等情况。②造模成功后第7、14、21、30、45、60天检查各组比格犬体重及血常规白细胞数值并记录。③植入粒子后第7d及第60d检查CT,确认粒子位置,并应用TPS计算等剂量曲线。在实验中心条件下正常喂养60天后处理全部实验比格犬,按第60d复查所得CT将其图片传入TPS粒子植入计划系统,进行验证,第60d刚好一个半衰期,处理实验犬后验证粒子活度基本在1.0mci左右,可按开始的2.0mci和1.0mci来计算距离粒子5mm位置的两次等剂量曲线(如图6),两次剂量曲线的差值可得出2个月内该位置所受辐射剂量约为:233Gy-120Gy=113Gy。即我们观察正常犬肺组织在113Gy的辐射剂量下的病理改变。④对各组比格犬右肺观察区域及对侧左肺同一位置肺组织同步进行取材,将两组比格犬的空白左肺分别作为自身对照的空白组,即模型A组与空白A组,中药B组及空白B组,作为四组标本同步行HE病理及电镜检查。
结果:1.比格犬各组一般情况:除了在造模后一周内,模型A组与中药B组均有不同程度的精神不佳、饮食稍差外,其余时间6只比格犬相互之间精神、进食、大小便及毛色等均无明显异常,5-7天后两组基本恢复正常,体重开始增加明显,模型A组及中药B组对比无较大差异(P>0.05);2.模型A组比格犬白细胞水平波动较明显,可以看出模型A组与中药B组几乎都在造模成功后第7d均出现白细胞的升高,且两组间比较无统计学意义(P<0.05),提示可能存在粒子植入手术影响导致的局部炎症反应,而随后两组在第14d时均出现白细胞水平下降也证明了这一点。随后,模型组和中药组比格犬白细胞水平呈逐步上升趋势,可能与辐射损伤所致放射性炎症相关,这与鞠等人[1]发表研究相似。第45d及第60d中药B组对比模型A组白细胞水平出现明显降低(P<0.05)。其他时间点两组比较无统计学意义(P>0.05)。3.CT检查:造模后第7d查CT两组CT图像未见明显变化;两组在60d时均发现只有在粒子极近处出现类似水肿、渗出等密度状超过肺组织,中药B组粒子周边所形成的类结缔组织较模型A组范围稍小。其余正常肺部组织未见明显异常;4.病理改变:空白A组及空白B组在镜下未见明显异常表现,两组相比较均未见明显病理改变。模型A组与中药B组均可见慢性炎细胞浸润,局部间质纤维化,细胞的水肿、变性;肺泡结构不清晰;静脉血管扩张,内皮细胞部分脱落;肺粘膜局部绒毛脱落;纤维组织增生,伴有部分肌层增厚等病理改变,但中药B组损伤程度整体较模型A组轻;5.电镜表现:空白A组及空白B组在各个倍数下未见明显异常表现。模型A组与中药B组在不同倍数下均显示细胞核中染色体存在固缩、边集化,内质网肿胀,大量空泡化线粒体,自噬体的出现,提示可能存在细胞修复动作。电镜下中药B组与模型A组肺损伤对比较HE明显,特别是线粒体损伤更加敏感,中药B组线粒体空泡化较模型A组减少明显,且少数线粒体仅出现部分嵴溶解、消失(均质状)。
结论:1.125I粒子植入比格犬肺组织可成功制作125I粒子放射性肺损伤比格犬模型,且验证了在治疗剂量下对正常肺组织的安全性。2.麻杏石甘汤对放射性肺损伤的干预作用是积极的,有一定的防治作用;3.麻杏石甘汤防治放射性肺损伤可能是通过可能是通过抑制抑制白细胞及炎性因子、改善炎细胞浸润及纤维组织增生,还有减轻染色体的固缩及边集化、保护线粒体的作用来发挥其对RILI的积极的干预作用。