应用多重实时荧光PCR检测儿童急性呼吸道感染常见病毒的研究

来源 :郑州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinxuchao1123
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目的急性呼吸道感染(Acute respiratory infection,ARI)是儿童最常见的呼吸道疾病,引起世界卫生组织(WHO)的广泛关注。本课题通过多重实时荧光PCR技术检测13种常见的引起急性呼吸道感染(ARI)的病毒原,探究急性呼吸道感染(ARI)病毒学流行特点及发展趋向,了解调查期间导致急性呼吸道感染(ARI)的病毒原与年龄、性别、季节以及呼吸道感染部位的关系,以便作出正确的诊断、制定合理的治疗方案和采取有效的预防措施。方法2016年1月-12月在郑州大学第三附属医院儿科门诊部通过咽拭子收集急性呼吸道感染鼻咽部脱落细胞及分泌物,以14岁以下儿童为研究对象,应用多重实时荧光PCR检测13种儿童急性呼吸道感染常见病毒病原,即甲型流感病毒(IFVA)、乙型流感病毒(IFVB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒Ⅰ-Ⅳ型(HPIV1-4)、鼻病毒(RV)、腺病毒(ADV)、人偏肺病毒(HMPV)、冠状病毒(COV)、博卡病毒(HBOV)和肠病毒(EV)。同时查阅所有研究对象的病史,收集临床资料,进行统计学分析。所有统计数据均采用SPSS21.0软件进行分析,以α=0.05为检验水准,组内两两比较以α=0.0167为检验水准。结果1.急性呼吸道感染病毒检出情况急性呼吸道感染病毒总阳性检出率35.38%(340/961),阳性率最高的是IFV,阳性率为6.45%,其中IFVB检出率高于IFVA,阳性率分别为3.95%(38/961)、2.50%(24/961),其次依次为RV、RSV、HPIV-3,阳性率分别为4.89%(47/961)、4.79%(47/961)、3.85%(37/961)。2.急性呼吸道感染病毒病原与季节的关系2016年秋冬季病毒检出率高于春夏季。RV在9月至11月之间阳性率最高,HPIV-3在1月、4月、5月阳性率较高,COV在8月、9月阳性率较高,RSV呈季节依赖分布:秋冬季阳性率明显升高,春季阳性率逐渐降低,IFVA秋末及冬季阳性率最高,夏季无检出,IFVB在1月、2月检出率最高,之后阳性率明显下降,ADV在5月、8月、9月阳性率较高,HMPV各月检出无明显规律。3.急性呼吸道感染病毒病原与年龄的关系多数病毒具有年龄依赖性分布特点:RV、HPIV-3、COV、RSV、HMPV感染患儿年越小,病毒阳性检出率越高;IFVA、IFVB感染患儿年龄越大,阳性率越高;ADV在各年龄组阳性率变化不大。5岁以下病毒阳性检出率占总检出率的90.97%(252/277),各年龄组病毒阳性率不同,在年龄上比较差异有统计学意义(χ~2=14.344,P=0.001),其中~1岁组阳性率为48.08%(125/260),阳性率高于~5岁组及5~岁组。RV、HPIV-3、RSV、HMPV在~1岁组阳性率最高,以上四种病毒阳性率在年龄上比较差异有统计学意义(χ~2=6.122,P=0.047;χ~2=6.702,P=0.035;χ~2=6.913,P=0.032;χ~2=6.530,P=0.038)。各年龄组间进行比较,病毒阳性率在~1岁组高于~5岁组,组间比较差异有统计学意义(χ~2=11.521,P=0.001)。~1岁组病毒阳性率高于5~岁组,组间比较差异有统计学意义(χ~2=8.357,P=0.004)。RV在~1岁组阳性率最高(7.69%),~5岁组阳性率最低(3.74%),经统计,~1岁组RV阳性率高于~5岁组,组间比较差异有统计学意义(χ~2=6.007,P=0.014)。4.急性呼吸道感染病毒病原与性别的关系男性与女性病毒阳性检出率差异无统计学意义。5.急性呼吸道感染病毒病原与呼吸道感染部位的关系HPIV-3、RSV、HMPV在急性下呼吸道感染(Acute lower respiratory infection,ALRI)的阳性率高于急性上呼吸道感染(Acute upper respiratory infection,AURI),两者比较差异有统计学意义(χ~2=7.756,P=0.005;χ~2=6.344,P=0.012;χ~2=19.202,P=0.000)。ADV在AURI的阳性率高于ALRI,两者比较差异有统计学意义(χ~2=3.958,P=0.047)。6.急性呼吸道感染病毒病原与混合感染的关系混合感染阳性检出率为6.56%(63/961),女性患儿阳性检出率(8.65%)高于男性(5.25%),两者比较差异有统计学意义(χ~2=4.302,P=0.038)。儿童急性呼吸道感染混合感染检出主要是5岁以下年龄组(90.48%,57/63),其中~1岁组阳性率(10.38%)明显高于其余两组(5.09%、5.36%),且总阳性率比较差异有统计学意义(χ~2=8.541,P=0.014)。各年龄组组间进行比较,~1岁组混合感染阳性率高于~5岁组,两者比较差异有统计学意义(χ~2=8.063,P=0.005)。ALRI混合感染阳性率高于ALRI,两者比较差异无统计学意义。混合感染90.48%是双重感染,RSV、ADV、HPIV-3、RV是混合感染模式中的主要病毒构成(78.79%),RSV检出率最高(28.79%,38/132)。结论1.儿童急性呼吸道感染病毒阳性率与年龄、季节、呼吸道感染部位有关,调查期间病毒总阳性率为35.38%,其中IFV、HPIV-3、RSV和RV是最主要病毒原,5岁以下儿童是急性呼吸道感染的高发人群,秋冬季节是急性呼吸道感染的高发季节。HPIV-3、RSV、HMPV在ALRI的阳性率高于AURI,ADV在AURI的阳性率高于ALRI。2.混合感染阳性检出率为6.56%,女性患儿阳性率高于男性,5岁以下儿童是混合感染的高发年龄,混合感染模式主要是双重感染,RSV、ADV、HPIV-3、RV是混合感染模式中的主要病毒构成,RSV是最常见混合感染病毒。
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