云芝[Coriolus versicolor]作为一种分布很广的药用真菌,其广泛的药理活性越来越受到人们的关注。其中,云芝多糖由于其显著的保肝、抗肿瘤等药用活性,常被作为临床辅助药物。菌种、培养基、培养方式等差异会导致多糖产量、结构和活性不同。为此,本论文对一株优良的云芝菌株的培养基、培养方式以及分离纯化工艺进行了优化,并对多糖的结构以及多糖复配物活性进行了分析和药理研究。从而为该菌株的深入研究及其开发利用打下了基础。论文的主要结果如下：(1)通过碳、氮源单因素实验,筛选出云芝菌株YK-505复合碳源和氮源,在此基础上,通过正交试验优化,获得了适宜的培养基：葡萄糖2%、蔗糖1%、酵母提取物0.15%、蛋白胨0.25%、磷酸二氢钾0.15%、磷酸氢二钾2%、七水硫酸镁0.15%。(2)利用固态培养基培养云芝菌株,菌株分泌的胞外多糖含量极少,菌丝体多糖含量与液体培养方式相比有差距。静置液体培养,产量更低,培养周期更长。液态发酵,产量高,培养周期短。(3)云芝菌株YK-505在摇瓶中单因素条件诱导的研究结果表明,菌丝体多糖适宜的培养基初始pH为6.0,装液量为50ml,摇床转速为150r/mmin,温度为28℃,培养周期为10d。采用响应面的方法对产菌丝体干重影响最大的三个因素进行优化,最佳组合条件为培养时间10d,装液量60m1,温度为28℃,优化后菌丝体干重达到9.718mg/ml。(4)云芝菌株YK-505在摇瓶中单因素条件诱导的研究结果表明,胞外多糖适宜的培养基初始pH为5.0,装液量为50m1,摇床转速为180r/min,温度为28℃,培养周期为2.5d。采用响应面的方法对产胞外多糖影响最大的三个因素进行优化,最佳组合条件为培养时间2.5d,装液量68ml,初始pH5.0,优化后胞外多糖达到12.14mg/ml。(5)优化了多糖的提取工艺,提取率为24%左右。初步纯化后胞内多糖的纯度可达到电泳纯。均一的胞内多糖Y-1(占全糖组分56.12%),主要由鼠李糖、岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖组成,经分析测定,含有p(1→2)键与p(1→3)键；胞外多糖经过分离、纯化,确定胞外多糖不含多肽,单糖组成至少含有葡萄糖、木糖,经分析测定,含有β(1→3)糖苷键。通过不同浓度氢氧化钠的多糖溶液与刚果红络合物最大吸光值的变化结果表明胞外多糖和YK-1都具有三股螺旋形式结构。(6)云芝多糖和银杏黄酮复配联用能改善CCl4导致的小鼠急性肝损伤,有协同效应,并存在量效关系,可降低肝指数。其中云芝多糖200mg/kg/d复配银杏黄酮100mg/kg/d降低T-Bil含量并且显著降低ALT、AST的活性,分别下降36.13%、28.89%。